麻枳降浊方对便秘型肠易激综合征模型大鼠肠组织MC的影响

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:papyevin
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目的:本研究通过冰水灌胃法建立便秘型肠易激综合征(irritablebowel syndrome,IBS)大鼠模型后,应用麻枳降浊方对其进行干预性治疗,通过观察大鼠的一般情况、肠道的病理形态学变化以及采用甲苯胺蓝改良法染色后观察大鼠回盲部、结肠组织内肥大细胞(mast cell, MC)个数的变化。探讨麻枳降浊方对便秘型肠易激综合征的治疗作用及其治疗机制,从而为临床上麻枳降浊方治疗便秘型肠易激综合征提供实验研究基础和理论依据。方法:(1)基线期:本研究选用清洁级健康雄性wistar大鼠40只,体重140±20g,大鼠均采用分笼独立饲养,笼底接纱网收集粪便。适应性饲养7天,正常生长后入选。(2)造模期:将40只大鼠随机分为两组,A组为正常对照组,共8只,给予正常饲食、饮水,不灌胃;B组为造模组32只,每天8:30灌胃1次,给予0-4℃生理盐水2ml,造模期共14天,观察大鼠灌胃后24h的粪便含水量,并记录。每隔7天测一次大鼠体重。(3)干预性治疗期:造模成功后A组大鼠正常饲食,饮水,不予灌胃。将B组随机分为4组,分别为模型对照组、西药对照组、中成药对照组及麻枳降浊方组,每组各8只大鼠,除模型对照组大鼠给予蒸馏水2ml/d以外,其余给予药物干预性治疗,药物剂量按照体表面积换算,西药对照组给予西沙必利3.6mg/kg/d,中成药对照组大鼠给予复方芦荟胶囊0.36g/kg/d,麻枳降浊方组大鼠给予麻枳降浊方6.3g/kg/d,干预性治疗期共2周。观察灌胃后24h各组大鼠粪便含水量的变化情况,并记录,每隔7天测一次大鼠体重,观察各组大鼠体重的变化。(4)评价期:末次给药后,禁食不禁水24h。处死大鼠留取标本。处死后迅速开腹取出全胃肠组织,测量幽门到回盲部的距离。然后迅速取各组大鼠的回盲部、结肠(距肛门5cm)各0.5cm,立即用生理盐水冲洗,l0%的中性甲醛固定液固定,常规石蜡包埋切片。在光镜下观察肠道组织的病理改变,取各组大鼠的回盲部和结肠的石蜡切片,每例每部位取3张,MC染色采用甲苯胺蓝改良染色法,光学显微镜下观察,进行MC计数。结果:(1)大鼠一般情况:造模后大鼠毛色无光干枯,精神易激惹,肢体无畸形,进食量减少粪便形态趋向于椭圆球状,灰褐色或灰白色,质硬,便长不均匀,长0.4-0.6cm之间,提示造模成功。干预性治疗后大鼠毛色转光泽,精神紧张感好转,肢体无畸形,进食量增加,粪便形态趋向于正常,黄褐色,便长约0.7cm。提示复方芦荟胶囊、西沙比利及麻枳降浊方对IBS-C模型大鼠的治疗均有效。(2)肠组织病理形态:肠黏膜上皮组织的结构完整,细胞排列整齐,未见器质性病变,较符合人体的生理病理变化。(3)MC的一般观察:采用甲苯胺蓝改良染色法染色后,光学显微镜可见MC分布于黏膜下层以及黏膜固有层内;细胞质被甲苯胺蓝染成紫红色,细胞核为蓝色,见部分MC呈脱颗粒状态,细胞形态改变。(4)MC的计数:模型对照组、西药对照组、中成药对照组及麻枳降浊方组大鼠回盲部MC计数分别较正常对照组增多(P<0.05);西药对照组、中成药对照组及麻枳降浊方组大鼠回盲部MC计数分别较模型对照组为减少(P<0.05);西药对照组、中成药对照组及麻枳降浊方组之间大鼠回盲部MC计数进行对比未见显著差异(P>0.05)。模型对照组、西药对照组、中成药对照组及麻枳降浊方组大鼠结肠组织MC计数分别较正常对照组增多(P<0.05);西药对照组、中成药对照组及麻枳降浊方组大鼠结肠组织MC计数分别较模型对照组为减少(P<0.05);西药对照组、中成药对照组及麻枳降浊方组之间大鼠结肠组织MC计数进行对比未见显著差异(P>0.05)。结论:造模期结束后,观察B组大鼠粪便的形态较前变小及其含水量也减少,肠组织常规病理学观察可见细胞整齐,组织完整,未见器质性改变,提示造模成功。治疗后粪便形态及含水量均趋向正常,但与正常对照组大鼠对比仍存在一定差异,提示干预性治疗期较短,尚未达到治愈。模型对照组大鼠回盲部及结肠组织MC计数较正常对照组增多,提示MC与IBS的发病存在密切关系,同时各治疗组经干预性治疗MC的数量较模型对照组减少,提示麻枳降浊方及各对照药物均能减少回盲部及结肠组织的MC数量,推测其治疗机制可能与减少肠组织MC的数量从而改善肠道感觉异常有关。
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