【摘 要】
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目的 本研究通过构建前列腺特异性膜抗原（PSMA）启动子／增强子靶向性调控的胞嘧啶脱氨酶（Cytosine Deaminase，CD）基因真核表达重组质粒pPSMApromoter／enhancer-CD(pPSMAE／P-CD)，探索pPS
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目的 本研究通过构建前列腺特异性膜抗原（PSMA）启动子／增强子靶向性调控的胞嘧啶脱氨酶（Cytosine Deaminase，CD）基因真核表达重组质粒pPSMApromoter／enhancer-CD(pPSMAE／P-CD)，探索pPSMAE／P-CD&尿嘧啶磷酸核糖转移酶（Uracil Phosphori-bosyltransferase，UPRT）／5-氟胞嘧啶（5-FC）(pPSMAE／P-CD&UPRT／5-FC)双自杀基因系统对前列腺癌特异的靶向杀伤作用。 方法 ①应用多聚酶链反应（PCR）技术从大肠杆菌工程菌株JM109基因组中扩增CD基因序列；通过分子克隆技术分别构建PSMA启动子增强子靶向性调控的CD基因真核表达质粒pPSMAE／P-CD及由巨细胞病毒（CMV）调控的对照质粒pCMV-CD、pCMV-UPRT；并通过PCR、酶切和DNA序列测定等方法进行鉴定。②脂质体介导转染重组质粒pPSMAE／P-EGFP进入前列腺癌细胞株和非前列腺癌细胞株，通过荧光表达观察PSMAE／P在前列腺癌细胞株LNCaP中的靶向调控作用。③四唑盐比色试验（MTT）法检测重组质粒pPSMAE／P-CD、pPSMAE／P-UPRT及其联合转染肿瘤细胞分别加入5-FC或5-FU后，对前列腺癌细胞生长抑制情况；同时，检测重组对照质粒pCMV-CD、pCMV-UPRT及其联合转染肿瘤细胞分别加入5-FC或5-FU后，对前列腺癌细胞和非前列腺癌细胞
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