目的:观察Cdkn2b和Fst基因在小鼠内耳发生发育过程中不同时段的动态表达,以了解Fst、Cdkn2b基因在小鼠内耳发生发育过程中的作用部位、时间。方法:选取胚胎第10.5天(E10.5)、E11.5、E12.3、E13.5、E15.5、E16.6、E18.5的ICR胎鼠,利用冰冻切片及免疫荧光化学组织染色技术观察在小鼠内耳发育过程中不同阶段Cdkn2b及Fst基因的表达特征及规律。结果:1)内耳发育过程中Cdkn2b蛋白动态表达:1.E10.5时期,此时期听泡逐渐向下伸展,其背内侧逐渐向下伸展形成耳蜗的基础和前庭部分。此时期Sox2主要表达于听囊的腹内侧区域,而此期还未见Cdkn2b有明显的表达。2.E11.5,此期,耳蜗原基向背内侧逐渐扩大伸长,呈口袋状。Sox2在前庭主要表达在椭圆囊、球囊原基,耳蜗内主要分布在前感觉区。此期我们可见Cdkn2b在前庭的背外侧区域和内侧区开始有微弱的表达。3.E12.5,耳蜗管向前延伸,呈钩状。Sox2在靠近耳蜗轴的感觉上皮中表达。此时,可以看出Cdkn2b在前庭区和周围的间充质中都有表达。4.E13.5,Sox2逐渐限制在感觉区,而此时Cdkn2b广泛表达在球囊区域,在耳蜗内以及耳周间充质中都可见其广泛的表达。5.E15.5,可见Cdkn2b在各个囊斑和壶腹嵴内均有明显的表达,但都在各感觉斑的一侧,并都局限在上皮细胞内表达,Cdkn2b在耳蜗顶圈表达较中圈和底圈更明显。6.E16.5,Cdkn2b在壶腹嵴内有表达,但是局限在壶腹嵴内一侧的感觉上皮细胞内7.E18.5,此时Cdkn2b在各感觉斑的上皮细胞内依旧可见其阳性表达,在耳蜗内,Cdkn2b在耳蜗顶圈的感觉上皮细胞表达最明显,其次是中圈,在底圈表达相对而言最弱。2)内耳发育过程中Fst蛋白动态表达:1.E10.5天,听泡逐渐向下伸展,形成耳蜗原基,sox2主要表达在听泡的腹内侧,Fst在听囊的背外侧区出现明显的高表达。2.E11.5天,听囊逐渐向下伸展延长,可见Fst主要表达于前庭区域,在耳蜗原基前端有微弱的表达。3.E12.5天,耳蜗管向前延伸呈钩状,约1/2圈。Fst在椭圆囊球囊感觉上皮均有表达,主要在椭圆囊的腹内侧感觉上皮细胞和球囊以及其周围的耳周间充质都中都可见表达信号。4.E13.5天,可见Fst仅在球囊的感觉细胞内有明显的表达信号,此时,可见Fst在耳蜗顶圈中表达信号明显。5.E15.5天,可见Fst主要在球囊的感觉上皮细胞内表达,在椭圆囊内和壶腹嵴内表达信号减弱,在耳蜗内主要表达于耳蜗的顶部以及中圈的前感觉外侧区域,在耳蜗底圈仅有弱表达。6.E16.5天,Fst在壶腹嵴以及椭圆囊和球囊的表达信号进一步减弱,在耳蜗底圈和中圈的表达信号明显减弱,在耳蜗顶圈的感觉细胞中有弱表达。7.E18.5天,Fst在耳蜗中表达主要局限在顶圈中,在中圈和底圈仅见微弱表达。结论:在小鼠内耳发育过程中,Cdkn2b从E12.5天开始在内耳感觉上皮表达,E18.5依然表达;Fst从E10.5天就开始在内耳感觉上皮表达,到E13.5后表达逐渐减弱。它们有不同的时空分布特点,表明它们在在内耳发育中可能具有不同的功能。