[目 的]研究诱导型一氧化氮合酶(iNOS)高表达对大鼠肛提肌卫星细胞(satellite cell,SC)成肌化的影响,揭示iNOS-p38-MAPK-HGF信号通路对SC成肌化的作用。[方 法]取液氮预先冻存的高表达iNOS卫星细胞和正常肌卫星细胞,进行体外培养;培养完成后,取部分高表达iNOS卫星细胞加入对iNOS具有特异性抑制作用的药物S-甲基异硫脲(SMT)。实验分为三组,分别为正常肌卫星细胞组、高表达iNOS卫星细胞组和高表达iNOS卫星细胞+SMT组。在相同时间段通过流式细胞仪检测细胞凋亡及坏死情况、MTS法检测细胞增殖能力和流式细胞仪检测细胞周期变化情况。分析高表达iNOS对肛提肌卫星细胞成肌化的作用;通过蛋白免疫印记法(Western Blot,WB)和实时荧光定量PCR法(QPCR)分别检测 iNOS、HGF、Pax7、Myod、P38MAPK、Desmin、α-SCA 在蛋白和 mRNA水平上的表达情况。[结 果]细胞凋亡及坏死:高表达iNOS卫星细胞+SMT组的细胞凋亡与坏死比率比正常培养的SC细胞和高表达iNOS卫星细胞组极显著提高;高表达iNOS卫星细胞组凋亡与坏死比率比SC细胞降低。细胞增殖能力:正常培养的SC细胞和高表达iNOS卫星细胞7天生长增殖能力大致相同;但高表达iNOS卫星细胞+SMT组生长增殖能力明显低于以上两组细胞。细胞周期变化:G1期:高表达iNOS卫星细胞组在该期的细胞比率极显著高于正常SC细胞和高表达iNOS卫星细胞+SMT组,正常SC细胞和高表达iNOS卫星细胞+SMT两组细胞在该期无差异。S期:3组细胞在该期变化较大,高表达iNOS卫星细胞组在该期细胞比例与正常SC正常细胞相比显著降低,高表达iNOS卫星细胞+SMT组在该期细胞比例与正常SC细胞相比显著升高,与高表达iNOS卫星细胞相比极显著升高。G2期:处于G2期的3组细胞变化相比不大,只有正常SC细胞处于该期的细胞比例略高于高表达iNOS卫星细胞,其他组别之间均无显著差异。蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测大鼠肛提肌中相关蛋白分子的表达水平:与正常SC细胞和高表达iNOS卫星细胞+SMT相比,高表达iNOS卫星细胞 iNOS、HGF、Myod、P38MAPK、Desmin、α-SCA 表达水平均提高,Pax7 表达水平下降。[结 论]本实验表明,iNOS对SC成肌化起促进作用,iNOS介导SC激活,因而推动卫星细胞的分化,其机制可能是iNOS通过iNOS-p38-MAPK-HGF信号发挥作用。