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目的:对多囊卵巢综合征(PCOS)患者给予口服小檗碱治疗3个月后,观察其卵巢颗粒细胞中糖原合成激酶-3β(GSK3β)表达及活性的改变,以及其糖代谢、激素水平的变化。探讨小檗碱可能通过对GSK3β活性的调节,改善卵巢颗粒细胞的胰岛素抵抗,降低雄激素分泌,为临床应用小檗碱治疗PCOS胰岛素抵抗及高雄激素血症提供基础理论依据。方法:行IVF/ICSI-ET的患者总共1 5例,1 8岁<年龄<35岁,所有患者BMI>23kg/m2,其中正常患者5例,PCOS患者10例,PCOS的诊断标准符合2003年鹿特丹标准:“(1)稀发排卵和/或者无排卵;(2)临床和/或生化高雄激素血症,并除外其他可能致病因素(如先天性肾上腺皮质增生,分泌雄激素的肿瘤,库欣综合征);(3)超声显示卵巢呈多囊改变,三项中符合其中两项,排除近三月使用影响实验的激素药物、其他雄激素过多疾病、全身系统疾病的患者以及不配合实验的患者,PCOS其中5例为口服小檗碱连续治疗3个月(0.5g/次,3次/日),另外5例未给任何干预,穿刺取卵后,收集卵泡液,提取卵巢颗粒细胞进行体外培养24小时后,换液后继续培养24小时后,收取细胞培养液中的睾酮(T)、孕酮(P)、雌二醇(E2)水平均采用放射免疫法检测;培养液中残糖量应用葡萄糖测定试剂盒(HK法)检测;细胞质中葡萄糖摄取应用2-NBDG计算;GSK3β活性变化利用GENMED活性试剂盒检测;卵巢颗粒细胞中总GSK3β,P-GSK3β(Ser9、Tyr216)的表达变化,采用免疫蛋白印迹(Western-blot)技术进行评估。结果:培养液上清结果显示,对照组、小檗碱组与PCOS组相比,睾酮水平低(P<0.05);小檗碱组与PCOS组相比,孕酮水平高(P<0.05),对照组与PCOS组相比,睾酮水平低(P<0.01),孕酮水平高(P<0.01);三组雌二醇水平无明显意义的变化(P>0.05);培养液残糖量对照组、小檗碱组比PCOS组水平低(P<0.01);2-NBDG摄取量对照组、小檗碱组与PCOS组相比,水平高(P<0.01);GSK3β活性小檗碱组较PCOS组低(P<0.05)、对照组较PCOS组活性低(P<0.01);免疫印迹中总 GSK3β表达无明显变化(P>0.05),P-GSK3β(Ser9)对照组、小檗碱组较PCOS组均表达升高(P<0.01),P-GSK3β(Tyr216)对照组、小檗碱组均较P COS表达降低(P<0.05)。结论:1.PCOS患者卵巢存在糖代谢障碍且雄激素分泌增加,PCOS患者卵巢颗粒细胞GSK3β磷酸化异常、活性升高。2.小檗碱可以视作为GSK3β的抑制剂,能够抑制PCOS患者卵巢局部GSK3β的活性、调节GSK3β磷酸化异常。3.GSK3β是导致PCOS患者卵巢局部糖代谢异常以及雄激素分泌过多的共同病理因素之一,是小檗碱治疗PCOS卵巢糖代谢异常和雄激素分泌过多的重要药效靶点。