【摘 要】
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背景及目的:乙型肝炎病毒(HBV)有四个开放阅读框(open reading frames,ORFs),其中ORF C由前核心(pre core)和核心基因(core)组成,同时编码乙型肝炎核心抗原(HBcAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg)。研究表明,HBeAg能显著抑制NLRP3炎症小体激活和IL-1β的产生。然而,HBcAg和ORF C(本文中,ORF C=HBcAg+HBeAg)的作用仍不
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背景及目的:乙型肝炎病毒(HBV)有四个开放阅读框(open reading frames,ORFs),其中ORF C由前核心(pre core)和核心基因(core)组成,同时编码乙型肝炎核心抗原(HBcAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg)。研究表明,HBeAg能显著抑制NLRP3炎症小体激活和IL-1β的产生。然而,HBcAg和ORF C(本文中,ORF C=HBcAg+HBeAg)的作用仍不清楚。我们的研究目的是评估HBcAg和ORF C是否能影响NLRP3炎症小体信号通路。方法:分别用0、50、100、500、1000、2000ng/ml的细菌脂多糖(LPS)刺激HepG2细胞,找到LPS刺激HepG2细胞的最佳浓度,并用该浓度的LPS分别刺激HepG2细胞0、1、6、12、18、24、30个小时,得到LPS刺激HepG2细胞的最佳时间。分别构建携带ORF C基因和core基因的载体,并将其导入HepG2细胞,然后用最佳浓度的LPS刺激这些细胞达最佳时间点。采用Western blot、定量逆转录聚合酶链反应(PCR)、酶联免疫吸附试验和免疫荧光检测NLRP3炎症小体的活性和白细胞介素-1β、白细胞介素-18的表达水平。结果:当1000ng/ml的LPS刺激HepG2细胞18-24小时后,NLRP3和白细胞介素-1β的表达达到峰值。HBcAg,而不是ORF C,通过活化核转绿因子κB(NF-κB)促进LPS诱导的NLRP3炎症小体的激活和IL-1β、IL-18的产生。结论:HBcAg能促进LPS诱导的NLRP3炎症小体的激活和IL-1β、IL-18的表达。这些发现为乙型肝炎病毒如何引起肝脏炎症提供了一种新的机制。
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