雌激素受体(estrogen receptor,ER)是属于类固醇激素核受体超家族成员，可介导雌激素实现其功能，是一种配体依赖性转录因子。它与雌激素特异性地结合，通过雌激素应答元件调节基因的转录，进一步影响雌性动物的第二性征、繁殖周期、生殖力、妊娠维持，从而影响胚胎发育和系统分化。然而越来越多的实验结果表明，雌激素受体除了对雌性动物有影响外，对雄性动物的生殖生理也具有调控作用。本研究先后在雄性奥利亚罗非鱼中克隆了两种雌激素β受体，并检测了它们在奥利亚罗非鱼中的组织分布模式，结合外源雌激素诱导和抑制内源雌激素生成方法来检测雌激素受体的差异表达等研究内容，初步探讨雌激素受体在硬骨鱼类性别分化和性腺发育中的作用。主要研究结果如下： 1、本文通过RACE和RT-PCR方法在雄性奥利亚罗非鱼中克隆得到了雌激素β受体的两种亚型(OaERβ1，OaERβ2)的cDNA全序列，分别为4262bp和2506bp，且最长开放读码框分别编辑557和667个氨基酸。序列同源性及系统进化树分析表明这两个基因均属于雌激素受体家族，且分类、命名与其他哺乳动物和鱼类一致。预测分析序列结构，OaERβ1和OaERβ2的～级结构均与其他核受体超家族相同，从N端到C端依次分为MB、C、D、E和F六个功能结构域。其中C区和E区高度保守，分别为DNA结合区和配体结合区，且C区具有每个雌激素受体C区所特有的两个锌指结构。 2、采用荧光定量RT-PCR方法，检测了OaERβ1、OaERβ2在奥利亚罗非鱼各组织的表达，结果表明：它们存在明显的组织特异性。OaERβ1在检测的各组织中均有表达，其中性腺、肝脏、肾脏、肠中表达量较高，卵巢的表达量最高，而在鳃和脾的表达量最低。OaERβ2基因在垂体、肝、肾、精巢中高表达，其中以精巢的表达量最高，而在胃未检测到ERβ2表达。 3、实时荧光定量PCR分析雄性奥利亚罗非鱼在雌二醇(E2)诱导和芳香化酶抑制剂(Letrozole)处理后下丘脑.垂体.性腺轴各ERs的表达情况得知：E2可直接诱导下丘脑-垂体-性腺轴各部位ER的表达，而垂体对雌激素的敏感性最低；并且雌激素作用在下丘脑主要是通过ERα介导的，而在精巢主要是通过ERβ2介导发挥作用。使用芳香化酶抑制剂Letrozole抑制内源雌激素分泌后，下丘脑和垂体大部分ERs的表达量均明显下降，只有下丘脑ERα表达量有所上升，可能是因为反馈作用的原因，同时也证明了ERα是下丘脑的主要表达模式。精巢ERα和ERβ1表达量稍微有所下降，但差异不显著；ERβ2表达量无明显变化，这表明雄性动物体内的内源性雌激素除了来自通常的内分泌外，还可能存在局部的旁分泌或自分泌。