【摘 要】
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目的:重楼是云南省生物医药与大健康产业的重点品种,也是近年来中药栽培和中药材产业扶贫的“优势”品种,其镇痛、止血、抗肿瘤等药效显著,为云南白药、宫血宁等80余种中成药的原料。然而目前存在(1)云南重楼及同属植物品种较多,鉴定困难,许多栽培基地品种混乱,药材混用严重;(2)质量评价方法不全面,质量标准不完善;(3)药用重楼资源短缺,迫切需要寻找“替代资源”等问题。因此,需要建立快速的鉴别和质量评价方
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目的:重楼是云南省生物医药与大健康产业的重点品种,也是近年来中药栽培和中药材产业扶贫的“优势”品种,其镇痛、止血、抗肿瘤等药效显著,为云南白药、宫血宁等80余种中成药的原料。然而目前存在(1)云南重楼及同属植物品种较多,鉴定困难,许多栽培基地品种混乱,药材混用严重;(2)质量评价方法不全面,质量标准不完善;(3)药用重楼资源短缺,迫切需要寻找“替代资源”等问题。因此,需要建立快速的鉴别和质量评价方法,以期为发掘新资源和临床安全用药提供依据。方法:本研究以重楼药材为研究对象,从重楼的产业、资源及研究数据分析、快速鉴别、质量整合评价、化学指纹图谱及质谱指认等方面进行研究。(1)运用数据挖掘的理念,通过挖掘“数据库”含重楼类的信息,分析重楼当前的产业现状与格局、资源的应用与资源现状和科研现状及存在的问题。(2)采用红外光谱结合化学计量学(聚类分析、主成分分析和偏最小二乘法判别分析)对云南重楼及其多叶组下近缘种进行快速鉴别分析;(3)应用UPLC法对重楼类药材的7种活性成分(重楼皂苷VI、重楼皂苷VII、重楼皂苷II、重楼皂苷I、重楼皂苷H、薯蓣皂苷、纤细薯蓣皂苷)进行含量测定,并对7种主要活性成分的动态变化进行分析,采用TOPSIS整合评价法对7种主要活性成分进行整合评价研究;(4)建立了重楼类药材的UPLC化学指纹图谱,结合UPLC-Q-TOF-MS指认分析重楼类药材中化学成分的等同性和差异性。结果:1、重楼在少数民族医药、民间医药和中成药中广泛应用,重楼药材价格涨势较快,后续市场具有较大潜力。中成药生产厂家市场分布广泛,市场广阔。重楼应用种类较多,但资源濒危严重,应引起重视。重楼的研究呈上升趋势,发展迅猛,但研究基础还较为薄弱,研究与产业和资源保护之间断层,专利成果转化较少。资源、科研和产业之间未能形成良性互动。2、云南重楼与近似种在植株大小、叶片、叶脉、萼片、花瓣、花亭和雄蕊等形态特征上存在一定的鉴别特征,可为其提供形态鉴别证据。6种重楼的二阶倒数在3000~2000 cm-1和指纹区1800~500 cm-1波段内差异明显,PCA和PLS-DA均能较好地区分云南重楼及近似种,可为其提供红外光谱鉴别证据。HCA结果表明云南重楼、七叶一枝、狭叶重楼、矮重楼和多叶重楼亲缘关系较近。3、10种重楼属药材综合评价结果表明:化学指数由高到低依次为长柱重楼(Ci=0.2755)>多叶重楼(Ci=0.2732)>大理重楼(Ci=0.2698)>云南重楼(Ci=0.2445)>南重楼(Ci=0.2345)>狭叶重楼(Ci=0.1591)>黑籽重楼(Ci=0.1416)>矮重楼(Ci=0.1178)>七叶一枝花(Ci=0.1151)>毛重楼(Ci=0.1149)。表明不同品种重楼综合质量差距较大,但长柱重楼、多叶重楼、大理重楼这三种重楼的整体综合指数比云南重楼高,南重楼与云南重楼综合质量较为接近,狭叶重楼、黑籽重楼、矮重楼、七叶一枝花、毛重楼这5种重楼的综合质量比药典重楼(云南重楼)差很多。长柱重楼、多叶重楼、大理重楼、南重楼可作为优良种质资源进一步研究与开发。4、建立了9种重楼类药材的UPLC指纹图谱,进一步通过UPLC-Q-TOF-MS指认分析结果表明,从9种重楼属植物中共指认出32个化学成分。结论:1、通过挖掘与分析重楼大数据信息,探讨当前重楼在产业、资源与科研发展现状以及存在的关键问题,为引导重楼的可持续、综合性发展提供思路。2、傅里叶变换红外光谱(FTIR)结合原植物形态鉴定能够快速鉴别云南重楼及其近似种,为重楼类药材的鉴别及临床用药的准确性提供科学依据。3、UPLC多指标含量测定结合TOPSIS分析整合分析,建立重楼类中药的化学品质综合指数,对重楼类药材的质量评价具有重要意义。4、UPLC指纹图谱结合UPLC-Q-TOF-MS分析探讨重楼类药材中化学成分的等同性和差异性,为发现新资源提供科学依据。
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