【摘 要】
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为了实现对磺胺类药(SAs)多残留和磺胺嘧啶(SD)单残留的免疫分析，本研究先后制备了抗磺胺类药母核结构(对氨基苯磺酰胺)和抗磺胺嘧啶的两种单克隆抗体，研究结果如下： 1、用化
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为了实现对磺胺类药(SAs)多残留和磺胺嘧啶(SD)单残留的免疫分析，本研究先后制备了抗磺胺类药母核结构(对氨基苯磺酰胺)和抗磺胺嘧啶的两种单克隆抗体，研究结果如下：
1、用化学方法合成了半抗原N-磺胺-4-氨基苯甲酸(SDL)，该半抗原包含磺胺类药的母核结构且以苯环为连接臂。采用混合酸酐法将SDL与人血清白蛋白(HSA)连接制备了免疫抗原SDL-HSA，用同样的方法将其与卵清白蛋白(OVA)连接制备了包被抗原SDL-OVA。用SDL-HSA免疫BALB/c小鼠，经融合筛选制备了7株单抗，其中SDL-4株腹水产量最高，且其效价在1：1.28×106以上。经单抗分型试剂盒鉴定，其亚型为IgG2b。间接竞争ELISA试验结果表明，其对多种商品化的磺胺药均有较强的识别能力，针对磺胺间甲氧嘧啶(SMM)、磺胺对甲氧嘧啶(SMD)、SD、磺胺喹恶啉(SQX)及磺胺二甲嘧啶(SM2)的50％抑制率(IC50)分别为：251.3、374.9、117.5、19.5和233.1ng/mL。以上结果表明该单抗可用于SAs多残留的免疫分析。
2、用重氮化-偶联法将SD与HSA连接制备了免疫抗原SD-HSA，用同样的方法将其与OVA连接制备了包被抗原SD-OVA，用过碘酸钠法将SD-OVA与辣根过氧化物酶(HRP)连接制备了酶标抗原(SD-OVA-HRP)。用SD-HSA免疫BALB/c小鼠，经融合、筛选和克隆制备了4株单抗，其中SD-4株腹水产量最高，且其效价在1：1.28×106以上。经单抗分型试剂盒鉴定，其亚型为IgG2b。直接竞争ELISA试验结果表明其对SD标准品的检测范围为1ng/mL-1000ng/mL，IC50为25.6ng/mL，与SMM、SMD、磺胺二甲氧嘧啶(SDM)、SM2、SQX及磺胺甲恶唑(SMZ)的交叉反应率分别为：1.3％、1.0％、0.6％、＜0.1％、＜0.01％、＜0.01％。以上结果表明该单抗可用于SD残留的免疫分析。
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