论文部分内容阅读
原发性肝细胞癌(HCC)是世界范围内最常见的肝胆管恶性肿瘤的类型。HCC的发病率以亚洲最高。肝切除、肝移植仍是目前可手术切除HCC的主要治疗方法。用于晚期HCC的靶向药物索拉非尼,效果不佳。mTOR在调节许多基本生命活动中发挥着中心作用。PI3K/Akt/mTOR信号通路在很多人类肿瘤中被激活,常伴随不良预后。mTOR可与Raptor和Rictor结合而形成mTORC1和mTORC2两个蛋白质复合物。两个复合物在细胞中作用不同,在调节脂质和蛋白质代谢上,mTORC1比较占优势;在调节细胞骨架组织和细胞迁移上,mTORC2有更多优势。然而,mTOR信号通路在HCC的分子机制还未被完全阐明。本课题组购买了上海芯超生物公司的含90例原发性肝癌患者的癌和癌旁组织的两张组织芯片,行免疫组化检测Raptor和Rictor蛋白的表达情况,并基因敲低肝癌细胞Rictor表达,以探索Rictor在HCC中发挥的作用和分子机理。结果:1.Raptor和Rictor蛋白均在原发性肝癌组织和癌旁组织的细胞浆中表达。Raptor在癌组织和癌旁组织中的表达有明显差异,且其表达与AJCC分期有显著相关;Rictor蛋白则与HCC患者的临床病例因素均无明显相关性。2.癌组织Raptor和Rictor表达均对肝癌患者的术后无复发生存期有显著性影响,Rictor还对患者的总生存期有显著影响。经单因素生存分析,癌组织Raptor和Rictor蛋白表达,术前血清ALT水平和AJCC分期与患者的无复发生存期有着密切联系,而Rictor表达,AJCC分期与患者总生存期显著相关。多因素生存分析结果表明,AJCC分期和癌组织Raptor表达是影响HCC患者无复发生存期的独立预后因素,而AJCC分期和Rictor表达是影响HCC患者总生存期的独立预后因素。联合分析指出,Raptor高表达Rictor低表达的患者的总体预后明显优于Raptor低表达Rictor高表达者,差异有统计学意义。3.亚组分析表明,有肿瘤包膜和无门脉癌栓亚组,Raptor高表达的HCC患者术后无复发生存期明显优于Raptor低表达者;在AJCC分期早期,有肿瘤包膜以及术前血清AFP≥20μg/L和TB<20μmol/L四个亚组里,Rictor低表达的HCC病人无论是术后无复发生存期还是总生存期都明显优于Rictor高表达者。4.基因敲低Rictor的表达抑制肝癌细胞株SMMC-7721和Hep3B的增殖、迁移和侵袭能力。Western blot表明,沉默Rictor可下调细胞周期蛋白CCND1的表达,上调p21表达而抑制增殖,上调E-cadherin,下调N-cadherin和vimentin的表达而抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结论:1.证实Raptor和Rictor蛋白在原发性肝癌和癌旁组织细胞浆内表达。2.癌组织Raptor表达与患者AJCC分期显著相关3.癌组织Raptor的表达是HCC患者术后无复发生存期的独立影响因素,而Rictor的表达是患者总生存期的独立预后指标。4.Rictor通过影响细胞周期蛋白表达和促进EMT来促进肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。