目的：应用实时荧光定量PCR验证喉鳞癌组织miR-193b的表达情况。构建hsa-miR-193b-3p慢病毒表达载体,制备并包装慢病毒,培养能够稳定表达目的基因的喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株。探讨反义寡核苷酸重组慢病毒(ASO-miR-193b)对喉鳞癌细胞生物学行为的影响。方法：采用实时荧光定量PCR检测喉癌组织以及癌旁组织中miR-193b的表达情况。设计并构建miR-193b质粒表达载体,共转染293T细胞后得到下调miR-193b表达的慢病毒载体。实验均分三组：实验组(miR-193b)、空白组、阴性对照组(NC),将其转染喉鳞癌Hep-2细胞,实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测miR-193b的表达水平来验证其转染效率。转染喉鳞癌Hep-2细胞后通过CCK-8增殖实验、克隆形成实验等观察其对Hep-2细胞增殖能力的影响。结果：Q-PCR检测发现喉鳞癌组织较癌旁组织miR-193b表达水平显著升高。成功构建下调hsa-miR-193b表达的慢病毒表达载体,滴度为1×108TU/ml的慢病毒颗粒。慢病毒载体下调Hep-2细胞内miR-193b的表达,细胞克隆形成率与对照组相比明显降低,P<0.05,48-72h组与对照组相比,ASO-miR-193b Hep-2细胞吸光度明显减少(P<0.05)。结论：本研究发现喉癌组织较癌旁组织miR-193b表达显著上调,提示miR-193b高表达可能与喉癌的发生发展相关。成功构建稳定且高表达的反义miR-193b的慢病毒表达载体。ASO-miR-193b可有效抑制喉癌细胞增殖。从而说明miR-193b的发挥致癌作用,为喉癌的基因治疗提供新的治疗靶点和理论依据。