葡萄糖通过Hippo通路促进YAP的激活

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背景:已经有研究证实,葡萄糖是癌细胞最主要的能量供给物质。一个充足的葡萄糖供给有利于癌细胞合成其必要的成分,从而加速癌细胞的增殖。YAP作为Hippo通路中最重要的组成分子,对癌细胞的增殖也有极大地促进作用。  目的:YAP在癌细胞中表现出一种原癌基因的特点,YAP的激活会引起细胞的增殖。葡萄糖作为癌细胞所需能量来源的主要提供者,同样会引起癌细胞的增殖,本实验为了探究葡萄糖是否会引起的YAP的激活进而影响癌细胞的增殖。  方法与结果:在对YAP的磷酸化信号调控中,我们发现在葡萄糖缺乏时,会出现YAP的高磷酸化表达,当重新加入葡萄糖,出现 YAP快速的去磷酸化表达。先前的研究证实,在血清的刺激下,YAP的去磷酸化作用增强而MST1和Lats1的蛋白水平在血清刺激下不受影响。本文证实,葡萄糖对 YAP磷酸化的影响呈现浓度依赖的特点。YAP的去磷酸化在葡萄糖浓度达到30nmol/L时最明显,而且,葡萄糖诱导YAP去磷酸化在8h刺激之后最为明显。为了确定葡萄糖是否是通过Hippo通路核心成员Lats1激酶调控YAP磷酸化,我们通过激酶实验来验证葡萄糖对Lats1激酶活性的影响。我们检测了Lats1的激酶活性并且发现Lats1激酶活性在葡萄糖刺激下快速被抑制。Lats1激酶活性被葡萄糖的抑制与内源性的 YAP的磷酸化的抑制一致,且均是浓度和时间依赖性的,表明葡萄糖降低YAP磷酸化是通过抑制Lats1激酶活性。而且,YAP的去磷酸化作用在过表达Lats1之后消除,进一步说明了Lats1在葡萄糖引起的YAP活性激活过程中的作用。葡萄糖是癌细胞能量的主要提供者,且会引起癌细胞的增殖,与癌细胞的转移相关,同时 YAP也会引起癌细胞的增殖,我们发现葡萄糖引起的细胞增殖的效应在 YAP被敲低的细胞中明显被抑制,且在给予葡萄糖刺激的情况下,YAP下游与增殖相关的基因表达升高。  结论:说明葡萄糖可通过Hippo通路引起YAP激活,进而引起癌细胞的增殖。
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