中华青牛胆化学成分及生物活性的研究

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中华青牛胆(Tinosporasinensis)为防己科(Menispermaceae)青牛胆属植物,分布于广西、广东、云南、斯里兰卡、印度等地,在广西瑶药中被称为青九牛,常用于治疗风湿性关节炎、风湿痹痛、腰肌劳损、坐骨神经痛等。现代科学研究表明青牛胆属植物主要含有萜类、木脂素等化学成分。二萜为其主要活性成分,具有抗炎、抗肿瘤等多方面药理活性。本论文对中华青牛胆的乙酸乙酯部位进行了系统的化学成分研究,共分离鉴定了 48个化合物,结构分别鉴定为:青牛胆苷A-D(1-4),表青牛胆苷D(5),青牛胆苷E-F(6-7),2-去乙酰基青牛胆苷D(8),2-去乙酰基表青牛胆苷D(9),2-去乙酰氧基青牛胆苷D(10),2-去乙酰氧基表青牛胆苷D(11),青牛胆苷G(12),tinosinesideA(13),1-deacetyltinosposide A(14),tinosineside B(15),青牛胆苷 H-I(16-17),tinocordiside(18),桦木苷(19),vervenone-10-O-β-D-glucopyranoside(20),青牛胆苷 J-M(21-24),开环异落叶松脂素-9-O-β-葡萄糖苷(25),银槭醇-9-0-反式-对-香豆酰基-4-O-β-D-葡萄糖苷(26),(+)-松脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(27),(+)-丁香脂素(28),tangeoside A(29),meliasendaninC(30),(-)-异落叶松树脂醇-3α-O-β-D-葡萄糖苷(31),vladinolD(32),N-反式-香豆酰酪胺(33),N-反式-阿魏酰基酪胺(34),N-反式-咖啡酰酪氨(35),(E)-3-[(2,3-反式)-2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3-羟甲基-2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英]-N-(4-羟基苯基)丙烯酰胺(36),thoreliamide B(37),grossamide K(38),cis-grossamide K(39),黄豆苷(40),紫丁香苷(41),tinosiene(42),反式-阿魏酸(43),香草酸(44),苄基-β-D-葡萄糖苷(45),3-甲醛吲哚(46),4-[2-甲酰基-5-(甲氧基甲基)-1H-吡咯]丁酸(47),5-羟甲基糠醛(48)。分离得到的48个化合物中,包括15个二萜(1-15),3个倍半萜(16-18),2个单萜(19-20),19个苯丙素(21-39)和9个其他类型化合物(40-48)。其中化合物1-12,16-17为萜类新化合物,化合物21、22为木脂素类新化合物,化合物23、24为苯丙酸类新化合物。中华青牛胆所含的二萜多为克罗烷型二萜,此类化合物具有多个手性中心,本课题利用多种核磁共振实验方法确定了新化合物1-12的相对构型,进一步结合圆二色谱法和ECD理论计算确定了新化合物1-3的绝对构型。采用MTT法对化合物1-18,21-24进行了细胞毒活性测试,结果表明化合物14对人宫颈癌HeLa细胞具有一定的抑制作用,IC50值为8.35±0.60μM。通过LPS激活N9小胶质细胞异常活化的筛选模型,以激活小胶质细胞释放NO为指标,测试了化合物1-15的体外抗神经炎症作用,结果表明所有测试二萜均不具有明显抗炎活性(IC50 ≥ 100 μM)。
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