加味三拗汤治疗哮喘作用机理的实验研究

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支气管哮喘是由多种细胞(如嗜酸粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等)和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病。尽管西医学对哮喘病发病机制和治疗方面的研究取得了较大进展,但其发病率在世界范围内仍有增高的趋势。因此,对哮喘病发病机理的深入研究和寻找有效的治疗方法具有非常重要的意义。中医药治疗哮喘具有悠久的历史和自身特色。传统的中药复方具有多靶点、多环节的作用特点,能影响哮喘病的诸多病理过程从而起到治疗作用。借助现代生物医学手段明确中药对哮喘的治疗作用并探讨其作用机理有助于从单味中药及中药复方中发现疗效可靠的哮喘新药。加味三拗汤(MX)是导师王庆国教授在古方三拗汤的基础上加味而成的。该方兼顾哮喘病气郁、痰凝、瘀阻的病机特点,在临床中能有效控制哮喘发作期症状,对哮喘缓解期治疗也起到一定的作用,具有一定的临床基础。本课题主要从MX的镇咳、祛痰、抗炎作用,MX的平喘作用及支气管解痉作用,MX抗气道炎症的作用三个方面进行实验研究,从而明确MX的治疗作用并部分阐明其作用机理。1目的观察MX的镇咳、祛痰、抗炎作用。明确MX的平喘作用及其对离体气管平滑肌的解痉作用。探讨MX对气道炎症的影响及MX抗气道炎症的作用机理。2方法以咳嗽潜伏期及咳嗽次数、酚红排泌量、耳肿胀度为指标,观察MX对小鼠氨水引咳模型、小鼠气管酚红排泌法模型、小鼠二甲苯致耳肿胀模型的影响,从而明确MX的镇咳、祛痰和抗炎作用。制备卵蛋白(OVA)致敏豚鼠哮喘模型,观察MX的平喘作用;制备豚鼠离体气管螺旋条,分别观察MX对磷酸组胺和氯化乙酰胆碱所致豚鼠气管平滑肌收缩的拮抗作用,MX对OVA刺激所导致的OVA致敏豚鼠气管平滑肌收缩的舒张作用和MX对正常及哮喘豚鼠静息状态下气管平滑肌的松弛作用。制备OVA致敏大鼠哮喘模型,观察MX对外周血嗜酸性粒细胞(EOS)计数、肺泡支气管灌洗液(BALF)中炎症细胞总数、分类计数和肺功能的影响。采用放免法观察MX对大鼠血浆和BALF中ET-1的影响;采用ELISA法观察MX对大鼠血清IL-4、IFN-γ和IL-5的影响。3结果3.1 MX的镇咳、祛痰、抗炎作用3.1.1 MX对浓氨水致小鼠咳嗽反应的影响MX和阳性药咳必清均能延长浓氨水致小鼠咳嗽的咳嗽潜伏期。与生理盐水组相比,
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