鸡舍环境气载微生物和PM2.5的检测及成分分析

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微生物气溶胶是动物舍空气环境污染的主要因素,为了评估不同鸡舍内环境微生物状况,本研究采用ANDEREN-6空气微生物采样器和ZR-3920型环境空气颗粒物(TSP/PM10/PM2.5)采样器分别对五个鸡舍养殖环境中的微生物气溶胶的含量与构成成分进行监测。采用国际标准的ANDERSEN-6级撞击式空气微生物收集器采集样品,采用5%的公绵羊血-琼脂培养基、沙堡弱培养基、伊红美兰培养基为采样介质分别对细菌、真菌、大肠杆菌予以采集。所采集的鸡场舍内中气载需氧菌的浓度0.167-4.484×104 CFU·m-3;气载真菌的浓度0.236-4.734×103 CFU·m-3;气载大肠杆菌浓度0-33.0CFU·m-3,对样品的空气动力学直径分析,分布在Andersen采样器5、6级(0.65-2.1μm)上的细菌、真菌占比分别为22%、25.5%,这部分菌群可进入呼吸道深处,对机体的危害更严重。将ANDERSEN-6级采样器5、6的细菌进行分离培养,培养基同样选取5%的公绵羊血-琼脂培养基,利用16SrRNA序列测定的方法进行鉴定,其中Staphylococcus、Corynebacterium、macrococcus为优势菌群,其中条件致病菌有表皮葡萄球菌、肠球菌、绿色气球菌、肺炎克雷伯氏菌。ZR-3920型环境空气颗粒物(TSP/PM10/PM2.5)采样器收集空气PM 2.5样品,采集滤膜选取防水型空气采样专用滤膜,空气流量设定为100L/h,采集器同样设置于鸡舍中央。根据采样时间和气流速度计算出PM2.5含量。结果表明,PM2.5的含量介于114μg/m~3-230μg/m~3,已到达中度和重度污染,依然严重威胁人和动物的健康。通过对Rank Abundance曲线分析可得,鸡舍内PM2.5中细菌和真菌物种的均匀度较低,且蛋、肉鸡舍物种的均匀度基本一致。通过对observed_species指数分析可得,蛋鸡舍物种多样性高于肉鸡舍,但差异不显著,通过对Beta多样性研究分析,不同类型的鸡舍中真菌和细菌物种的多样性都存在差异。基于16SrRNA和ITS1高通量测序方法对PM2.5样品中的细菌、真菌分别进行鉴定,得出PM2.5样品中细菌在门水平上Firmicutes(厚壁菌门)、Bacteroidetes(拟杆菌门)、Proteobacteria(变形菌门)、Actinobacteria(放线菌)为优势菌群,其中Firmicutes在肉鸡舍中所占比例较高,而Bacteroidetes在蛋鸡舍所占比较高例较高,在属水平上优势菌种为Faecalibacterium、Lactobacillus(乳杆菌属)、Oscillospira(颤螺菌属),Escherichia(埃希氏菌属),Escherichia在肉鸡舍含量较高,Bacteroides(拟杆菌属)在蛋鸡舍含量较高。PM2.5样品中真菌在门水平上优势菌群为Ascomycota(子囊菌门)、Basidiomycota(担子菌门)。在科水平上排名前10的主要物种为Trichocomaceae、Un--s-Agaricomycetes sp、Un--s-Agaricales sp、Davidiellaceae、Pleosporaceae、Un--s-Polyporales sp、Un--s-Ascomycota sp、Un--s-Hypocreales sp、Un--s-Hymenochaetales sp、Hypocreaceae,属水平上Aspergillus(曲霉属)为优势菌群,蛋鸡舍的含量明显高于肉鸡舍。
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