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目的:胶质瘤作为神经系统中最为常见的原发性恶性肿瘤之一,具有显著的低生存率、高死亡率、高复发率等特点,其中位生存期仅为12～15个月。虽然手术、放疗、化疗等治疗方式在胶质瘤的治疗中已取得长足发展,然而因为某些特殊原因,胶质瘤患者的预后仍不甚乐观。于是,肿瘤的血管生成拟态（vasculogenic mimicry,VM）进入了我们的视野。VM作为一种不依赖于机体内皮细胞的全新血流灌注系统,形态学上由肿瘤细胞和基底膜构成具有微循环功能的网状结构。迄今为止,VM在胶质瘤、胃癌、肝细胞癌等多种肿瘤中均有发现,且其出现即预示着患者更为不良的预后。因此当前所急需的即是针对胶质瘤的分子机制以及VM的研究。RNA结合蛋白（RNA binding proteins,RBPs）在肿瘤的发生和发展阶段中发挥剪接、转录、翻译、稳定性等不可或缺的作用。TIAR（TIA-1 related protein）属于TIA家族中的一员,有文献报道TIAR的上调可延长胶质瘤患者生存期。目前TIAR在胶质瘤中的表达以及在VM中均未见报道。长链非编码RNA（long non-coding RNAs,lnc RNAs）属于非编码RNA家族中的一员,其长度大于200个核苷酸。越来越多的证据表明lnc RNAs与肿瘤的进程密切相关。最近的研究表明LOXL1-AS1（LOXL1 antisense RNA 1）在乳腺癌、卵巢癌与结直肠癌等多种肿瘤中发挥致癌作用。然而,LOXL1-AS1在胶质瘤VM中的作用与机制尚不清楚。微小RNA系长度介于20-24个核苷酸的非编码单链RNA分子,在肿瘤中参与转录后的基因表达。miRNA通过靶向目的蛋白的3’UTR区域,进而调控肿瘤细胞的恶性生物学行为与肿瘤进程。最近文献报道了miR-374b-5P在非小细胞肺癌中发挥抑癌效应,其上调可显著抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移与侵袭的能力,可作为非小细胞肺癌的潜在靶基因与预后指标。然而,目前miR-374b-5P在胶质瘤中的作用与机制仍未可知。本文旨在探讨TIAR、LOXL1-AS1以及miR-374b-5P在胶质瘤VM中的作用机制,为胶质瘤治疗提供实验基础与理论依据,并为胶质瘤治疗探寻新的潜在的靶点。研究方法:1.通过实时定量PCR和western blot检测TIAR、lnc RNA LOXL1-AS1、miR-374b-5P在胶质瘤组织和细胞系中的表达。2.将胶质瘤细胞U87和U251转染,筛取稳定表达的TIAR、LOXL1-AS1、miR-374b-5P、MMP14和VEGFA过表达与沉默的细胞系。通过western blot和q RT-PCR验证转染细胞的转染效率。3.通过增殖、迁移、侵袭及三维管形成实验来评估TIAR、LOXL1-AS1、miR-374b-5P、MMP14和VEGFA在胶质瘤细胞恶性生物学行为和VM形成中的作用。4.我们通过裸鼠移植瘤模型,以及CD34和PAS双染色,来评估TIAR、LOXL1-AS1和miR-374b-5P是否影响体内VM的形成。结果:1.TIAR在胶质瘤细胞和组织中低水平表达,TIAR的过表达抑制胶质瘤细胞的恶性生物学行为以及管形成能力。2.LOXL1-AS1在胶质瘤细胞和组织中高水平表达。LOXL1-AS1的沉默抑制胶质瘤细胞的恶性生物学行为以及管形成能力。3.过表达的TIAR通过降低LOXL1-AS1的稳定性,下调其表达,进而减弱胶质瘤细胞的恶性生物学行为以及管形成能力。此外,过表达的LOXL1-AS1逆转了过表达的TIAR对胶质瘤细胞的肿瘤抑制作用。4.miR-374b-5P在胶质瘤细胞和组织中低表达,miR-374b-5P的过表达抑制胶质瘤细胞的恶性生物学行为以及管形成能力。5.下调LOXL1-AS1对miR-374b-5P发挥海绵样作用,可显著抑制细胞增殖、迁移、侵袭和VM形成。沉默的miR-374b-5P逆转了沉默的LOXL1-AS1在胶质瘤中的抑制作用。6.miR-374b-5P的过表达通过靶向MMP14和VEGFA mRNA的3’UTR区域,抑制胶质瘤的恶性生物学行为和VM。过表达的MMP14以及VEGFA逆转了过表达的miR-374b-5P对胶质瘤细胞的恶性生物学行为以及VM的抑制效应。7.在体实验证明了TIAR的过表达、LOXL1-AS1的沉默以及miR-374b-5P的过表达三者联合作用抑制了裸鼠移植瘤的生长,延长了裸鼠生存期,且减少了裸鼠移植瘤内的VM。结论:1.TIAR和miR-374b-5P在胶质瘤的组织和细胞中低表达,而LOXL1-AS1在胶质瘤组织和细胞中高表达。TIAR与miR-374b-5P的过表达以及LOXL1-AS1的沉默显著抑制了胶质瘤细胞的增殖、迁移、侵袭等恶性生物学行为以及VM的形成。2.TIAR通过降低LOXL1-AS1稳定性,负向调控其表达。LOXL1-AS1与miR-374b-5P靶向结合,miR-374b-5P靶向结合MMP14以及VEGFA m RNA的3’UTR区域。3.过表达的TIAR通过降低LOXL1-AS1稳定性,减少LOXL1-AS1与miR-374b-5P的结合,从而增加了miR-374b-5P对MMP14与VEGFA的负向调控作用,抑制了胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭等恶性生物学行为以及VM的形成。4.单独或联合过表达TIAR、沉默LOXL1-AS1、过表达miR-374b-5P显著抑制了裸鼠移植瘤的生长与移植瘤内的VM,并延长了裸鼠的生存期。5.TIAR/LOXL1-AS1/miR-374b-5P轴在调控胶质瘤细胞生物学行为以及VM形成中发挥重要作用。