目的:1.观察经糖皮质激素（Glucocorticoid,GC）外用治疗的银屑病患者治疗前后及复发时皮损基因表达变化及γδT细胞在皮损及外周血的改变;2.构建模拟临床GC治疗后银屑病复发的小鼠模型;3.观察分泌白细胞介素17（Interleukin17,IL-17）的γδT（γδT17）细胞是否与GC治疗后银屑病复发相关;4.γδT17细胞在皮肤与外周之间的迁移是否是导致银屑病复发的关键因素;5.研究CCR6、CCR2是否参与GC治疗过程中γδT17细胞的迁移。方法:1.招募银屑病患者,予以2周GC外用治疗,分别于治疗前、治疗后及复发时取皮损及外周血,取皮损通过RNA-seq检测与银屑病相关的基因水平的变化,取皮损及外周血通过流式细胞学技术检测CD3、γδT细胞的比例;2.模拟临床上银屑病患者外用GC治疗后复发这一过程,利用WT小鼠构建相应动物模型,即将C57BL/B6小鼠按体重随机分为GC治疗组及凡士林（Vas）对照组。第1天（day 1,D1）开始所有小鼠双耳涂抹咪喹莫特（Imiquimod,IMQ）（10mg/耳/天）构建银屑病小鼠模型直至D5,由D6开始小鼠涂抹IMQ（10mg/耳/天）3h后涂抹卤米松或Vas（10mg/耳/天）做对照直至D21,治疗结束后所有小鼠停药休息2Week（W）,而后涂抹IMQ（10mg/耳/天）连续7天引起银屑病复发。Tcrd^-/-小鼠也按上述造模方式分组,分别将WT、Tcrd^-/-小鼠分为GC治疗组和Vas对照组,即WT/IMQ/Vas组、WT/IMQ/GC组、Tcrd^-/-/IMQ/Vas组、Tcrd^-/-/IMQ/GC组,监测每组小鼠耳朵厚度变化,分别于D21、D35、D42时间点获取小鼠耳部皮肤、颈部引流淋巴结、远端腹股沟淋巴结组织,流式细胞学技术检测CD3⁺、γδ、Vγ4⁺、Vγ4⁺V4δ⁺T细胞比例及分泌IL-17的细胞比例;3.IMQ再次刺激前给小鼠注射FTY720抑制淋巴结细胞迁移,监测小鼠耳朵厚度变化,于D42获取小鼠皮肤、颈部引流淋巴结及腹股沟淋巴结组织,流式细胞学技术检测CD3⁺、γδT细胞、Vγ4⁺、Vγ4⁺V4δ⁺T细胞比例及分泌IL-17的细胞比例;4.引入Ccr6^-/-、Ccr2^-/-小鼠,将WT、Ccr6^-/-、Ccr2^-/-小鼠分别分为激素治疗组和凡士林对照组,即WT/IMQ/Vas组、WT/IMQ/GC组、Ccr6^-/-/IMQ/Vas组、Ccr6^-/-/IMQ/GC组、Ccr2^-/-/IMQ/Vas组、Ccr2^-/-/IMQ/GC组,监测小鼠耳朵厚度变化,于D21获取皮肤、颈部引流淋巴结、腹股沟淋巴结组织,流式细胞学技术检测CD3⁺、γδT细胞、Vγ4⁺、Vγ4⁺V4δ⁺T细胞比例及分泌IL-17的细胞比例。结果:1.银屑病患者GC外用治疗后PASI评分明显下降,RNA-seq结果表明多种趋化因子如CCL20、CCL2在治疗后表达降低,皮损处γδT细胞比例降低,而外周血γδT细胞比例升高;病情复发时PASI评分明显升高,CCL2等趋化因子表达上调,皮损处γδT细胞比例升高,而外周血γδT细胞比例降低;2.利用WT小鼠成功构建模拟临床GC治疗后银屑病复发动物模型,而Tcrd^-/-小鼠GC治疗后疾病复发程度与未治疗组无统计学差异;WT小鼠模型中,经GC治疗后分泌IL-17的γδT、Vγ4⁺、Vγ4⁺V4δ⁺T细胞比例在皮肤中明显下降,而在颈部引流淋巴结及远端腹股沟淋巴结明显升高,银屑病复发时经GC治疗后的皮肤中分泌IL-17的γδT、Vγ4⁺、Vγ4⁺V4δ⁺T细胞比例快速升高,而在引流淋巴结及远端淋巴结显著降低或与对照组无显著差异;3.利用FTY720（芬戈莫德,Fingolimod）抑制淋巴结细胞迁移后,诱导疾病复发时经GC治疗的小鼠银屑病复发程度减轻,分泌IL-17的CD3、γδT、Vγ4⁺、Vγ4⁺V4δ⁺T细胞在引流淋巴结升高而在皮肤和腹股沟淋巴结降低;4.与利用WT小鼠构建的模型相比,Ccr2^-/-小鼠出现与其相似的表型,即小鼠耳朵厚度变化与WT相似,经GC治疗后分泌IL-17的γδT、Vγ4⁺、Vγ4⁺V4δ⁺T细胞比例在皮肤中明显下降,而在引流淋巴结及远端淋巴结中明显升高;Ccr6^-/-/IMQ/Vas和Ccr6^-/-/IMQ/GC组小鼠耳朵厚度分别持续低于WT/IMQ/Vas和WT/IMQ/GC组,Ccr6^-/-/IMQ/GC组引流淋巴结及远端淋巴结中分泌IL-17的γδT、Vγ4⁺、Vγ4⁺V4δ⁺T细胞比例明显低于Ccr6^-/-/IMQ/Vas组。结论:1.银屑病外用GC治疗能有效缓解病情,治疗前后及复发皮损处趋化因子的变化及皮损和外周血γδT细胞比例的规律变化提示疾病的好转与复发可能源于γδT细胞在皮损及外周血间重分布;2.利用WT小鼠而不是Tcrd^-/-成功构建了GC治疗后疾病复发模型,表明γδT细胞是GC治疗后银屑病复发的关键细胞,GC治疗能有效缓解病情并促使分泌IL-17的γδT细胞迁移至引流及远端淋巴结,而疾病复发时上述细胞回流至皮肤导致疾病更快发生;3.是CCR6而不是CCR2在介导γδT细胞迁移中发挥重要作用。