转AhDREB1基因毛白杨的分子鉴定及耐盐性分析

来源 :北京林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:LIUANQING5201314
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毛白杨是我国特有的乡土树种,分布广,寿命长,栽培历史悠久,是很好的造林及纸浆生产树种之一,然而当土壤含盐量达到3‰时,部分毛白杨不能正常生长,甚至死亡。这也是影响毛白杨在我国大面积推广的一个主要原因。利用转基因技术导入抗性基因是短期内改良杨树品种的重要途径。目前,已经完成了基因的转化过程,即将耐盐的AhDREB1基因导入毛白杨中。本研究是以生长良好的9个抗卡那霉素的转基因株系为试材,通过Southern杂交验证、耐盐性鉴定及盐胁迫下生理生化指标的测定来综合分析转基因植株中目的基因可能调控的代谢途径。主要结论如下:(1)Southern杂交结果为,T12、T46、L26、L63、L73植株出现特异性杂交带,拷贝数为1-2,其余转基因植株及对照植株并未出现杂交带,这表明AhDREB1基因是以多拷贝的方式整合在毛白杨基因组的不同染色体位点上。在Southern blot图谱中,均含有一条800bp左右的杂交带,说明可能存在外源基因的整合热点。(2)盆栽试验表型测定结果表明,当盐水浓度大于3‰时,对照植株便开始死亡,而转化植株的成活率仍为100%;当盐水浓度大于5‰时,对照植株已全部死亡,而转化植株的成活率仍可以保持到84.4%。表型结果可以说明通过转基因确实可以提高植株的耐盐性,为了充分证明这一结论,对3.55‰、5.48‰NaCl浓度下的植株进行生理生化指标的测定。(3)通过试管苗及盆栽耐盐试验测定生理生化指标得出,转基因植株的脯氨酸含量高于对照,说明转基因毛白杨适应盐胁迫的能力较强;转基因植株的叶绿素含量、过氧化物酶和超氧物歧化酶活性也都高于对照,说明转基因毛白杨在盐胁迫下所受伤害较小;转基因植株的丙二醛含量低于对照,也说明转基因毛白杨在盐胁迫下所受伤害较小。因此,转AhDREB1基因毛白杨的耐盐能力要远远优于非转基因毛白杨。
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