【摘 要】
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实验小鼠冷冻胚胎库的建立主要包括冷冻技术路线的建立、冷冻胚胎遗传质量的检测和数据的记录、统计三个部分。 1.在建立冷冻技术路线部分,对胚胎收集的超排方案作了优化实
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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实验小鼠冷冻胚胎库的建立主要包括冷冻技术路线的建立、冷冻胚胎遗传质量的检测和数据的记录、统计三个部分。 1.在建立冷冻技术路线部分,对胚胎收集的超排方案作了优化实验。在雌鼠的年龄与体重、激素注射时间等因素不变的条件下,我们选择了2.5IU、5.0IU、7.5IU三个剂量组的激素PMSG、HCG进行超数排卵,对近交系小鼠C57、129/J分别实验。结果表明:C57BL/6小鼠5.0IU剂量组平均取卵数明显高于2.5IU剂量组和7.5IU剂量组(P<0.05);129/J小鼠7.5IU剂量组平均取卵数明显高于其他剂量组(P<0.01)。 体外培养小鼠着床前胚胎实验,选取常用的M16、CZB、KSOM培养液,在37℃、5%CO2条件下对封闭群ICR小鼠的合子进行体外培养至囊胚阶段,结果表明:KSOM培养液的囊胚发育率最高,与CZB培养液的结果相比有极显著差异(P<0.01),与M16培养液的结果相比也有显著性差异(P<0.05),但是M16培养液与CZB培养液的结果相比差异不显著(P>0.05)。 为探讨不同冷冻方法对胚胎冷冻结果的影响,选用慢速冷冻法、玻璃化冷冻法(EFS40,麦管)和OPS冷冻法对ICR小鼠和C57小鼠的桑椹胚和囊胚进行冷冻比较;选用玻璃化冷冻法(EFS40,麦管)和玻璃化冷冻法(DAP213,冷冻管)对C57小鼠的8-cell阶段胚胎进行冷冻比较;选用快速冷冻法(PROH,麦管)对C57小鼠的2-cell
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