论文部分内容阅读
垫状卷柏（Selaginella pulvinata）为卷柏科Selaginellaceae卷柏属Selaginella植物,作为中药“卷柏”收载于2015版《中国药典》中,广泛分布于四川、云南、西藏、广西、广东、江西、湖北、河南和河北等地,具有活血通经、消炎散热的功效。近年来研究表明垫状卷柏中含有黄酮类、炔酚类、木脂素类等化学成分,具有降血糖、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤和抗病毒等药理作用,我国民间常用其治疗糖尿病。垫状卷柏在降血糖方面具有较大的开发潜力。为了进一步合理利用该中药资源,充分发挥其药用价值,本论文对垫状卷柏的化学成分和降糖活性进行了系统的研究。综合运用MCI反相柱色谱、C18反相柱色谱、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、中压液相以及制备高效液相色谱等分离手段,对垫状卷柏的化学成分进行了研究。从垫状卷柏95%乙醇提取物中,共分离纯化得到了20个化合物。利用正相手性色谱柱成功分离了其中三对难分离的木脂素差向异构体,并通过现代波谱技术（紫外、红外、核磁、圆二色谱）和化学沟通方法等对这些化合物的结构进行鉴定,分别为tamariscinoside G（SP-1*）,tamariscinoside H（SP-2*）,pulvin A（SP-3*）,moellenoside C（SP-4*）,tamariscinol V（SP-5）,（2R,3S）-dihydro-2-（3,5-dimethoxy-4-hydroxy--phenyl）-7-methoxy-5-acetylbenzofura n（SP-6）,syringaresinol（SP-7）,pulvpeptin A（SP-8*）,selaginellin（SP-9）,selaginpulvilin A（SP-10）,3-（4-hydroxy-phenyl）-6,7-dihydroxy coumarin（SP-11）,穗花杉双黄酮（SP-12）,pratensein-7-O-β-D-glucopyranoside（SP-13）,unciflavone E（SP-14）,丁香酸（SP-15）,2,6-dihydroxy-3,4-dim ethylbenzoic acid methyl ester（SP-16）,4-ethoxy benzoic acid（SP-17）,苯丙酸（SP-18）,黑麦草内酯（SP-19）,海藻糖（SP-20）,其中SP-1～SP-4,SP-8为新化合物,化合物SP-1～SP-4均为降碳木脂素类;化合物SP-8为含八个氨基酸残基的环肽化合物,这也是首次在卷柏科中发现的环肽类化合物;SP-1～SP-2和SP-5分别以成对的差向异构体存在,在常规C18制备液相色谱中难以分离,本论文中利用Daicel Chiralpak AD-H型手性色谱柱成功对其进行了色谱分离,得到了化合物SP-1a～SP-1b,SP-2a～SP-2b和SP-5a～SP-5b;其中化合物SP-13,SP-16～SP-19为首次从卷柏属植物中分离得到。本论文采用3T3-L1细胞葡萄糖摄取模型和α-葡萄糖苷酶抑制实验对部分化合物的体外降血糖活性进行了评价。3T3-L1细胞葡萄糖摄取实验测试结果表明化合物SP-1,SP-3～SP-4,SP-12在10μg/m L时对3T3-L1细胞葡萄糖的摄取显示出了不同程度的促进作用,其中SP-3和SP-4促进3T3-L1细胞摄取葡萄糖表现出较好的浓度依赖性。α-葡萄糖苷酶抑制实验结果显示所测化合物在5 mg/m L时均未显示出明显的抑制作用。