目目的分析我国1117例初治成人急性淋巴细胞白血病(ALL)的临床及生物学特征;探讨t(1;19)/TCF3 PBX1和PAX5重排阳性ALL的形态学、免疫学、细胞和分子遗传学及临床特点。方方法所有患者均采用骨髓细胞直接法和/或短期培养法制备染色体,采用R显带进行核型分析,应用FISH和PCR技术检测TCF3 PBX1融合基因,应用FISH技术对伴有abn(9p)异常的B ALL患者进行PAX5基因缺失或重排的筛选,并结合形态学和临床资料进行分析。结结果1、单中心1117例初诊成人急性淋巴细胞白血病患者的临床及生物学特征1117例初诊ALL中,B ALL有833例(74.6%),为最多见的免疫表型,另外有239例(23.9%)为T ALL,45例(4%)为混合型表达的ALL(MPAL)。统计分析发现,B ALL患者的平均年龄显著高于T ALL(P<0.01),平均白细胞(WBC)和血红蛋白(Hb)显著低于T ALL(P<0.01)。按FAB诊断标准,1117患者中428例(39.9%)为L1,342例(31.9%)为L2,35例(3.3%)为L3,267例(26.7%)为未能分类(NOS)型。四组病例的临床和实验室资料统计分析后发现,在起病年龄方面,L1<L2<L3<NOS(31.2<33.4<34.9<35.3岁),其中L1组患者的平均年龄显著小于L2组和NOS组(P<0.05)。外周血常规和生化检测结果显示,在平均WBC计数方面,L1>L2>NOS>L3(74.6>70.6>52.2>14.2×109/L),其中L3组显著低于其余三组(P<0.001),NOS组显著低于L1组(P<0.05);在平均血小板(PLT)计数方面,NOS>L3>L2>L1(89.3>79.4>74.0>69.1×109/L),其中NOS组显著高于L2和L1组(P<0.05);在平均Hb水平方面,NOS>L3>L1>L2(92.1>91.0>88.2>87.3g/L),四组之间差异无统计学意义(P>0.05);在平均乳酸脱氢酶(LDH)水平方面,L3>L1>L2>NOS(1543.8>1047.8>1017.8>706.8U/L),四组之间无显著性差异(P>0.05)。1117例成人ALL中,1043例(93.4%)核型分析成功,其中635例有克隆性核型异常,总的核型异常率为61%。其中B ALL的异常率最高,达65.7%,MPAL次之,为60%,T ALL最低,仅为45.2%。在按常规染色体分析和/或BCR ABL融合基因检测的1090例患者中,伴t(9;22)(q34;q11.2)/BCR ABL异常的患者共有256例(23.5%),Ph+ALL的发病率随着年龄的增长而增加,发病高峰在30~39岁这个年龄段。与Ph ALL相比,Ph+ALL患者的起病年龄显著更大(P<0.01),WBC计数显著更高(P<0.01),但LDH水平显著更低(P<0.01)。t(9;22)通常不是该类患者唯一的异常,68%的患者伴有其他异常,其中最常见的伴随异常为增加了一个Ph染色体,其余较常见的伴随异常有7、abn(9p)、HeH、+8、+X等。涉及11q23/MLL基因重排的异常共有54例( 5% ) ,其中以t(4;11)(q21;q23)/MLL AF4异常为主,共有41例(3.8%),与其他Ph ALL患者相比,t(4;11)(q21;q23)/MLL AF4组病例的平均WBC计数显著更高(P<0.0001),平均PLT计数显著更低(P<0.0001)。除以上两种常见的异常外,其他特异性的染色体异常均较少见,其中t(1;19)(q21;p13.3)/TCF3 PBX1有38例(3.5%), t(8;14)(q24;q32)/c MYC重排有11例(1%),涉及14q11和14q32重排的患者分别有16例(1.5%)和9例(0.8%),del(6q)有27例(2.5%),del(7p)/ 7有13例(1.2%),+8有31例(2.8%),+X有20例(1.8%),abn(9p)有68例(6.2%),abn(11q)有27例(2.5%),del(12p)有9例(0.8%),del(13q)/ 13有15例(1.4%),del(17p)有9例(0.8%),复杂异常13例(1.2%),HeH有20例(1.8%),Ho Tr和Tt各有9例(0.8%)。不能划入以上核型异常组的异常均归入其他异常组,共100例(9.2%),该组病例男性患者所占比例(80%)显著高于其他Ph ALL(P<0.01),其他各项指标如年龄、性别、WBC等虽与其他Ph ALL不尽相同,但却没有统计学差异。2、t(1;19)/TCF3 PBX1阳性成人急性淋巴细胞白血病的临床和实验研究1117例初诊ALL中共有38例(3.5%)t(1;19)(q21;p13.3)/TCF3 PBX1阳性病例,根据免疫学特征,其中B ALL有36例,T ALL有2例。染色体核型结果示平衡易位[t(1;19)]有14例,不平衡易位[der(19)t(1;19)]有20例,正常核型3例,1例核型分析失败。将34例有核型异常的患者按染色体倍数进行分类,其中假二倍体有28例(82%),45条染色体的亚二倍体有3例(9%),47 50条染色体的超二倍体有3例(9%)。FAB分类中L1型病例占大多数(25/38,66%)。本组患者中位WBC为20.5(3.1~211)×109/L,中位Hb水平为90(41~142)g/L,中位PLT计数为37(12~295)×109 /L,中位LDH水平为1623(166~8293)U/L。本组19例住院患者中17例患者有不同程度的肝、脾、淋巴结等髓外浸润,经1个疗程诱导化疗后,94.7%的患者获得完全缓解(CR),中位无复发生存(RFS)时间为3.2个月,中位总体生存(OS)时间为7.2个月。与其他Ph ALL患者相比,该类患者起病年龄显著更小(P<0.05),平均LDH水平显著更高(P<0.05)。3、伴有abn(9p)异常B ALL患者PAX5基因重排或缺失的筛选及其生物学特征研究选取横跨PAX5基因的RP11 344B23和RP11 652D9克隆,常规抽提DNA,采用缺口平移法标记荧光素,应用FISH技术对79例伴有abn(9p)异常B ALL患者中的50例进行PAX5基因重排或缺失的筛选。本组79例abn(9p)患者中位年龄为32岁,中位WBC为21.6(1.4~382)×109/L,中位Hb水平为78(31~134)g/L,中位PLT计数为47(6~198)×109 /L,中位LDH水平为589(75~6038)U/L。染色体核型方面,abn(9p)组B ALL最常见的核型异常为假二倍体(52例,66%),其次为染色体数目45条的异常(18例,23%),其余异常均非常少见,其中染色体数目在42~44条范围的异常有3例(4%),染色体数目为47条的超二倍体有3例(4%),染色体数目在61~72条范围之间的近三倍体有2例(3%)。在本组病例中,最常见的伴随异常是t(9;22)(q34;q11)/BCR ABL ,共有27例( 34% ),其次是t(1;19)(q21;p13.3)/TCF3 PBX1,有6例(8%),其中涉及MLL重排的伴随异常仅见1例。50例经FISH检测的标本中,单倍体缺失的患者有23例(46%),部分缺失的患者有2例(4%),典型易位重排的仅有1例(2%),总的异常率为52%。该例PAX5重排阳性患者的核型描述为:46,XY,t(2;9)(q24;p13),del(9)(p13)[7]/46,XY[3],其中与9p13上PAX5基因易位的2q24为新的染色体位点。26例PAX5缺失或重排患者的中位年龄为28.5岁,中位WBC为18.6(2.8~94.6)×109/L,中位Hb为67(51~134)g/L,中位PLT为44(6~198)×109 /L,中位LDH水平为583(117~5658),这些数值与PAX5检测阴性的24例患者相比无显著差异(P>0.05)。结结论1、本组成人ALL中B ALL有833例,占总数的74.6%,是成人ALL中最常见的亚型,同时65.7%的B ALL有核型异常,是成人ALL中核型异常率最高的亚型。2、本组初治成人ALL总的核型异常率为61%,其中最常见的异常是t(9;22)(q34;q11.2)/BCR ABL,其他特异性异常的发生率均不足10%。3、本组成人ALL具有独特的生物学特征,有助于阐明东亚人群成人ALL的遗传学特征。4、t(1;19)(q23;p13.3)/TCF3 PBX1阳性成人ALL有着独特的临床和实验室特点,治疗缓解率高,但短期内易复发,总生存期短,应该采取更积极的治疗以改善预后。5、abn(9p)的B ALL中PAX5缺失或重排的发生率为52%,PAX5异常患者与PAX5检测阴性患者之间生物学特征无显著差异。6、核型分析是最基本的遗传学分析,联合FISH、PCR等分子遗传学技术有助于更全面的了解患者的遗传学信息。