长白落叶松LoWRKY1基因克隆及功能分析

来源 :东北林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:camelwin2000
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
我国原生树种长白落叶松(Larix olgensis)具有早期生长快、适应性强等优良性状,且分布广泛具有重要的经济及生态价值。目前长白落叶松的组织培养及遗传转化体系已经建立,是研究针叶树分子机理的理想材料。WRKY转录因子可在植物体应对干旱、耐盐、高温、低温等非生物胁迫时发挥重要作用。本研究克隆了长白落叶松LoWRKY1基因,对其进行生物信息学分析;通过q RT-PCR技术分析了不同非生物胁迫下该基因的表达情况;将其转入异源植物烟草及本源植物长白落叶松,分别测定其在Na Cl、PEG胁迫下的多种生理指标,以此验证该基因功能。得到研究结果如下:(1)LoWRKY1基因含1 035 bp的CDS序列,编码344个氨基酸,所编码蛋白存在一个保守WRKY domain结构域,为不稳定碱性亲水蛋白,含有51个磷酸化位点,50个糖基化位点。进化树分析结果显示其与北美云杉、银杏亲缘关系最近。(2)qRT-PCR分析显示,LoWRKY1基因在长白落叶松的根中的表达量最高,茎次子,叶中最低。在Na Cl、PEG和ABA处理下,该基因在根、茎、叶中的表达情况各不相同,初步分析认为,LoWRKY1基因可能在植株遭受非生物胁迫时参与响应,在不同组织部位对不同胁迫的响应程度不同。(3)构建重组载体VB191103-1905rcy-LoWRKY1,采用热激法转化到农杆菌Gv3101中,对烟草进行遗传转化。Na Cl、PEG胁迫处理后的试验结果表明,LoWRKY1基因在烟草中的异源表达增强了光合系统对逆境的敏感性,抗氧化酶(POD、SOD)活性低于野生型,丙二醛(MDA)含量高于野生型,说明与野生型相比转基因烟草的耐盐性和抗旱性更差。(4)采用农杆菌转化法侵染长白落叶愈伤组织,将获得的转化子进行GUS组织化学染色,无色愈伤组织被染为蓝色,DNA分子水平PCR检测成阳性。将验证成功的转LoWRKY1的愈伤组织与野生型分别进行Na Cl、PEG处理,结果表明野生型愈伤组织保护酶SOD、POD活性高于转基因愈伤组织,MDA含量低于转基因愈伤组织,其生长状态优于转基因愈伤组织,结果表明LoWRKY1的过表达降低了胚性愈伤组织的抗逆性。(5)长白落叶松胚性愈伤组织的体胚发生试验结果表明,与野生型相比转基因体胚发生量更高。
其他文献
孟子所谓"浩然之气",就是盛大而刚直的正气。这种气,如果用正直去培养它而不损害它,那么人就可以挺立于天地之间。这种气,是跟仁义礼相配合的,否则就会泄漏。孟子心目中的"大丈夫",无疑充满着浩然之气;孟子身上就完美体现了这种浩然之气,并对后世产生了深远的影响。
期刊
<正>11月14日召开2023年度国家艺术基金湖南项目复评辅导会。湖南省文化和旅游厅副厅长张帆,艺术处处长向才平,湖南省艺术研究院院长、国家艺术基金湖南项目管理办公室主任邹清华莅临会议。湖南省艺术研究院、国家艺术基金湖南项目管理办公室相关负责人以及项目答辩辅导专家、湖南省进入复评的18个大型项目答辩代表参加会议。
期刊
风力发电系统的形成是我国近年来注重电力体制改革背景下,强调可持续发展战略下所兴起的清洁能源发电模式,在实际的应用中尤其需要注重发电设备的故障维修问题。以可靠性为中心形成预防性维修决策技术,通过建立相应的维护机会模型,研究风力发电设备在运行中可能出现的故障概率,从而形成有效的预防性维修作用。这样的技术应用能够保障风力发电系统始终处于良好的应用状态。
培养学生的核心素养是当前小学英语课堂的教学目标,教师在设计与组织英语课堂教学活动时,应基于此选择适合学生的学习内容,为学生自主学习英语提供良好的平台和科学的指导,以取得理想的教学效果。文章分析了基于核心素养培养的小学英语课堂优化路径,从奠定学生思想观念基础、提升学生学习能力、增强学生社会参与意识三方面提出建议。
乡村振兴是国家七大发展战略之一。培育与发展新型农业经营主体,是健全并完善农村金融服务体系是贯彻落实国家战略的必然要求。农民专业合作社是农村经济发展、农民增收的重要新型农业经营主体,是实施乡村振兴、建设全面小康社会、实现共同富裕的重要力量。福建省农民专业合作社虽然在数量上取得了快速的增长,辐射带动超过40%以上的农户发展,但尚未进入高质量发展阶段,仍处于初始阶段,而因农民专业合作社信贷难及其风险问题
开展航线客流量预测,是中小机场进行规划与设计、开辟与运营航线和测算市场运营补贴的前提基础。为此,本文确立了“中小机场航线客流量预测问题研究”的选题,以期通过此课题的研究为中小机场开展相关决策提供理论支持。根据中小机场航线运营的特点,对中小机场的航线客流量的预测分为机场既有航线和新开航线两类,因此本文开展的主要研究工作如下:(1)对中小机场具有小样本数据特征的既有航线客流量预测问题进行研究。针对中小
目的 观察百令胶囊联合阿奇霉素治疗小儿支原体肺炎的疗效及对血清可溶性程序性死亡受体1(sPD-1)、细胞因子样蛋白1(CYTL1)水平的影响。方法 选取2018年3月—2021年9月海南医学院第二附属医院儿科二区诊治支原体肺炎患儿140例,通过随机数字表法分为对照组和观察组,各70例。对照组给予阿奇霉素治疗,观察组在对照组基础上联合百令胶囊治疗。比较2组患儿的总有效率、症状改善时间,治疗前后肺功能
[目的]揭示陕西省延安市退耕还林还草进程中土壤侵蚀强度时空递变规律,为水土保持规划与评价、土地资源管理和生态修复等问题的研究提供参考。[方法]基于延安市1990—2020年遥感影像解译结果及水利部土壤侵蚀分级标准(SL190-2007),引入偏移份额模型对延安市土壤侵蚀情势进行分析。[结果](1)延安市土壤侵蚀变化情势整体表现为北部剧烈,南部缓和,并以2000年为拐点实现从侵蚀加剧到逐渐恢复的转折
<正>一、要研究吃透新课标和新版考纲,重点关注历史核心素养,并用于指导课堂教学与复习备考1.课标是教材的灵魂,也指导中考命题,其重要性不言自明,所以对新课标一定要认真研究,才能总体把握课本的重要知识点。新版课标特别强调历史核心素养的重要性,认为核心素养是学生学习历史过程中逐步形成的、适应个人终身发展和社会发展需要的关键能力、必备品格与价值观念。相应地,学科核心素养自然成为中考考查的重点,因此我们要