骆驼蓬(Peganum harmala L.)为蒺藜科(Zygophyllaceae)骆驼蓬属(Peganum)多年生草本植物，民间常以种子或全草入药，主要活性成分是β-咔波啉类(β-carboline)和喹唑啉类(Quinazoline)生物碱。临床制剂多用于治疗咳嗽气喘、无名肿痛等症，而且具有对中枢神经系统等广泛的生物活性。研究发现，骆驼蓬总生物碱提取物中的主要活性成分去氢骆驼蓬碱(Harmine，HAR)和骆驼蓬碱(Harmaline，HAL)具有较强的抗乙酰胆碱脂酶和抗单胺氧化酶活性，是有效防治阿尔茨海默病(Alzheimers Disease，AD)、帕金森症(Parkinsons Deasease)及抑郁症等中枢神经退行性疾病的潜在药物，其开发具有巨大的社会效益和经济效益。　　 本文在前期研究中优化得到骆驼蓬总生物碱提取工艺及其质量标准的基础上，对其总提取物、生物碱部位以及非生物碱部位提取物进行了有效部位筛选试验，并对骆驼蓬总生物碱的制备工艺进行中试放大生产;根据其与常用药剂辅料相容性考察等处方前研究，筛选合适的辅料，优化得到处方最佳制备工艺，设计研制了骆驼蓬总生物碱薄膜包衣片，并建立其质量标准研究;建立了灵敏、准确、稳定的UPLC-ESI-MS/MS检测分析方法，对骆驼蓬总生物碱薄膜包衣片在Beagle犬体内的药物代谢动力学进行研究，计算得到体内的药动学参数以及其生物利用度，为临床前研究提供充分的实验数据参考。　　 1、骆驼蓬总生物碱提取物有效部位筛选及中试放大试验　　 采用化学药品东莨菪碱及30％乙醇记忆再生性障碍及记忆获得性障碍动物模型，运用避暗实验比较骆驼蓬总提取物、骆驼蓬总生物碱部位以及非生物碱部位提取物对痴呆动物模型的学习记忆能力的影响，对骆驼蓬提取物抗AD药理作用的有效部位进行筛选。结果发现，骆驼蓬总生物碱提取物在较高剂量时对东莨菪碱所致记忆获得性障碍和30％乙醇所致小鼠记忆再生性障碍有显著的改善作用，而低剂量的总碱提取物、骆驼蓬总提物以及非生物碱部位提取物对此均无明显改善作用;证明骆驼蓬总生物碱提取物为发挥药效作用的有效部位，而非生物碱为无效部位。　　 根据前期研究中优化得到的骆驼蓬总生物碱提取工艺，进行中试放大试验。称取适量骆驼蓬种子药材，加入10倍量85％-90％乙醇，浸泡12h后加热回流提取2h，重复提取3次，合并药液后浓缩至呈流浸膏状，加入4倍量4％盐酸溶液充分搅拌溶解后，静置沉淀，过滤得酸水提取液，加适量饱和氢氧化纳溶液调至pH11，静置沉淀后，过滤，干燥沉淀，即得骆驼蓬总生物碱提取物。通过以上述中试工艺最终制得6批HAR和HAL百分含量总和超过50％的骆驼蓬总生物碱提取物，证明该提取工艺的稳定可靠，也为后续片剂处方工艺筛选和优化、中试放大工艺验证和药动学等课题研究提供稳定合格的原料。　　 2、骆驼蓬总生物碱薄膜包衣片的制备工艺研究　　 以HAR和HAL为主要指标成分，采用影响因素试验结合差示扫描量热分析法(Differential scanning calorimetry，DSC)及有效成分含量测定等方法，对骆驼蓬总生物碱提取物与常用药剂辅料的相容性进行处方前研究。结果表明，骆驼蓬总生物碱提取物及其辅料混合物在高温和光照条件下性质稳定，高湿条件下指标成分含量下降较明显，出现结块现象;DSC分析结果表明，骆驼蓬总生物碱提取物不宜与乳糖和硬脂酸镁配伍。　　 以累积释药百分率为指标，采用单因素法对片剂处方进行初步筛选，并选择崩解剂(A)、粘合剂(B)的用量作为主要考察因素，以5、10min时HAR、HAL累积释药百分率(Q5、Q10)（加权后）和崩解时限的总评“归一值”OD为评价指标，进行星点设计-效应面法实验(Central composite design-response surface method,CCD-RSM)，并进行了处方验证;确定骆驼蓬总生物碱片最佳制备工艺:骆驼蓬总生物碱提取物50g，淀粉87.2g，均过5号（80目）筛，按内外加法加CMS-Na7.5g，混合均匀，加入含2.3gPVPK30的10％乙醇溶液制备软材，20目筛制颗粒，湿颗粒于60℃-80℃干燥，加滑石粉3g，混合均匀，过16目筛整粒，压成1000片。　　 运用正交设计实验进行片剂薄膜包衣处方筛选后，发现自制包衣液虽然防潮效果较好，且成本较低，但长期暴露于空气中性质并不稳定，易于变色，选择欧巴代(OPADRY)作为处方薄膜包衣材料，并按照3％包衣增重进行包衣。　　 3、骆驼蓬总生物碱薄膜包衣片质量标准研究　　 以HAR和HAL为指标成分，分别采用薄层色谱/薄层-生物自显影技术和高效液相色谱等方法对骆驼蓬总碱片剂的主要指标成分HAR、HAL进行定性、定量分析测定，完成了指标成分含量测定的方法学验证，考察了释放介质、转速等因素对药物释放的影响，采用相似系数法(f2法）对溶出曲线的相似性进行评价，建立了骆驼蓬总碱片体外溶出度测定方法，选择转桨法，转速100rpm，溶出介质为pH4.5磷酸盐缓冲液;并对其外观、片重差异、脆碎度、崩解时限等检查项进行考察;　　 以片剂外观性状、HAR和HAL含量以及体外溶出度为考察指标，进行制剂稳定性研究。影响因素试验结果表明，骆驼蓬总生物碱薄膜包衣片在高温或强光条件下性质稳定，片剂外观、指标成分HAR和HAL的含量及溶出度均无明显变化;在高湿条件下，片剂的外观性状无明显变化，指标成分含量、体外溶出度变化并不显著，但在相对湿度75％±5％条件下放置10天时，供试品吸湿增重仍超过5％，达到6.14％，表明本品吸湿性较强。建议骆驼蓬总生物碱薄膜包衣片长期保存时应选择密闭性好的防潮材料，干燥贮存。加速试验和长期试验尚未完成，后续实验将继续对其进行考察，并最终制定制剂的有效期。　　 4、骆驼蓬总生物碱薄膜包衣片及缓释胶囊剂药动学和生物利用度研究　　 进行骆驼蓬总生物碱薄膜包衣片和缓释微丸胶囊在Beagle犬体内的药动学研究，建立了UPLC-ESI-MS/MS血浆生物样品检测分析方法，并完成方法学考察;对Beagle犬口服骆驼蓬总生物碱薄膜包衣片、缓释微丸胶囊以及静脉注射HAR、HAL后及其对应代谢产物的血药浓度进行测定分析，绘制了HAR、HAL及其代谢产物哈尔醇（Harmol，HOL）、哈马酚(Harmalol，HAM)的药时曲线，并运用PKSolution2.0药代动力学软件计算相应的药动参数，研究生物碱提取物两种主要成分在体内的药动学行为。结果表明，Beagle犬口服骆驼蓬总生物碱薄膜包衣片后HAR和HAL的绝对生物利用度分别为5.33±2.60％和24.99±6.11％;口服骆驼蓬缓释微丸胶囊后HAR和HAL的绝对生物利用度分别为3.05±1.50％和12.62±6.41％;以骆驼蓬总碱片作为参比制剂，缓释微丸胶囊剂中HAR和HAL的相对生物利用度分别为79.52±64.89％和54.63±30.93％。　　 综上所述，本研究完成了骆驼蓬总生物碱提取物的有效部位筛选试验及中试放大生产;筛选和优化得到骆驼蓬总生物碱薄膜包衣片的优化处方制备工艺，建立了完整的片剂质量标准;对骆驼蓬总生物碱薄膜包衣片及缓释微丸胶囊进行药代动力学研究，考察了制剂生物利用度，为骆驼蓬新药的开发奠定坚实的基础。