论文部分内容阅读
背景颅脑爆震伤是现代战争及日常生活中常见的外伤类型,也是目前国内外军事医学研究的重点内容。颅脑爆震伤后神经细胞的水肿、变性、坏死等一系列变化,使得颅脑损伤机制错综复杂。自噬(autophagy)是细胞的一种高度保守降解途径,将细胞内无用的大分子如长寿命蛋白质、细胞器等运送至溶酶体,降解成有生物活性的小分子,并将这些小分子重新利用和维持细胞内环境稳定的过程。近年来发现自噬在颅脑损伤后表达增强,可能与颅脑损伤后神经元自我保护作用有关。高压氧是一种无创性治疗颅脑损伤的辅助性方法,其疗效是肯定的,但其具体作用机制至今尚不清楚。本课题拟建立大鼠颅脑爆震伤模型,研究伤后及高压氧治疗后自噬的变化,并且观察高压氧治疗对脑皮质神经细胞自噬与凋亡的影响。目的(1)建立大鼠颅脑爆震伤模型；(2)大鼠颅脑爆震伤后脑皮质自噬表达变化的研究；(3)高压氧治疗对大鼠颅脑爆震伤后脑皮质自噬与凋亡的影响。方法(1)通过600mgTNT当量的电雷管在垂直距离8cm、10cm、12cm处进行爆炸,于伤后24h行头颅MRI检查,6h、24h、3d、7d行检测损伤区光镜、电镜下病理变化,选择合适的爆炸距离,建立稳定的动物模型；(2)用600mgTNT电雷管在大鼠头部正上方垂直距离12cm处爆炸,于伤后6h、24h、3d、7d分别采用RT-PCR和Western blotting方法检测脑皮层中Beclin-1的表达情况；(3)用600mgTNT电雷管在大鼠头部正上方垂直距离12cm处爆炸,高压氧治疗组(HBO)分别于伤后3h、22h、及以后每天同一时间行HBO处理,分别于6h、24h、3d、7d采用RT-PCR和Western blotting方法检测皮质脑组织中Beclin-1和Caspase-3的表达情况结果(1)8cm组大鼠几乎在当天全部死亡,10cm组大鼠存活时间也较短,少有存活7天,12cm组大鼠存活时间在7天以上,且伤后24小时MRI提示挫伤区存在血肿及挫裂伤,病理学提示皮质、脑膜、脑室周围、神经元胞体、线粒体等均出现不同程度水肿；(2)在伤后6h脑皮层中Beclin-1的表达上升,伤后3d表达最强,伤后7d表达有所下降；(3)与对照组相比,Beclin-1和Caspase-3在爆震伤组及HBO组表达均增加,而HBO组中Beclin-1和Caspase-3表达则较爆震伤组有所减少。结论(1)600mgTNT电雷管在距离大鼠头部垂直12cm处可制作稳定的大鼠颅脑爆震伤模型；(2)大鼠颅脑爆震伤后,脑皮层中Beclin-1表达呈波峰状,提示自噬现象在颅脑爆震伤后增强,可能参与颅脑爆震伤神经元损伤后的应激反应；(3)高压氧通过降低细胞的自噬和凋亡表达,可能是治疗颅脑损伤的机制之一。