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目的探讨1-甲基-4-苯基-吡啶离子（MPP+）诱导人神经母细胞瘤（SH-SY5Y）细胞凋亡过程中p53及其相关基因的变化，并探讨葛根素的保护作用。方法用含13%胎牛血清的DMEM完全培养基进行传代培养人神经母细胞瘤（SH-SY5Y）细胞。按实验设计将细胞分为6组：对照组；MPP+模型组；50μmol/L葛根素+MPP+处理组；100μmol/L葛根素+MPP+处理组；150μmol/L葛根素+MPP+处理组；p53抑制剂（Pifithrin-ɑ）+MPP+处理组。采用倒置显微镜观察各组SH-SY5Y细胞形态学的改变；噻唑蓝（MTT）法测定各组SH-SY5Y细胞存活率；Annexin-V/PI流式细胞分析术检测各组SH-SY5Y细胞凋亡率；免疫印迹法（Western blotting）检测各组SH-SY5Y细胞中p53蛋白的相对表达量；实时荧光定量PCR（real-time quantitative reverse transcription-PCR，RT-PCR）技术分析各组SH-SY5Y细胞中p53及其相关基因p21、MDM2、Bax、Bcl-2、Caspase-3mRNA相对表达量。结果1.形态学改变，对照组细胞呈梭形，细胞突起结构较长较多；MPP+模型组细胞大部分突起结构减少，细胞变圆，贴壁细胞数目减少；葛根素预处理组和p53抑制剂（Pifithrin-ɑ）组，细胞形态逐渐好转。2MTT结果显示对照组，MPP+模型组，50μmol/L葛根素+MPP+处理组，100μmol/L葛根素+MPP+处理组，150μmol/L葛根素+MPP+处理组，Pifithrin-ɑ+MPP+处理组的细胞存活率分别为100.0%±0.0%、36.0%±0.5%、52.0%±3.0%、76.6%±4.8%、86.0%±2.0%、92.0%±2.0%，葛根素和p53抑制剂预处理可以明显提高细胞存活率（P<0.05）。3Annexin-V/PI流式细胞分析术检测结果显示对照组，MPP+模型组，50μmol/L葛根素+MPP+处理组，100μmol/L葛根素+MPP+处理组，150μmol/L葛根素+MPP+处理组，Pifithrin-ɑ+MPP+处理组的细胞凋亡率分别为12.01%±3.31%、31.78%±1.50%、25.34%±1.06%、21.70%±3.2%、16.28%±0.90%、14.23%±2.43%，表明葛根素可以降低MPP+诱导的SH-SY5Y细胞的凋亡率（P<0.05）；同样，p53抑制剂也可以降低MPP+诱导的SH-SY5Y细胞的凋亡率（P<0.05）。4Western blotting检测p53蛋白的表达结果表明MPP+使p53蛋白的表达增高，差异具有统计学意义（P<0.05），而葛根素和p53抑制剂干预又使p53蛋白的表达降低。对照组，MPP+模型组，50μmol/L葛根素+MPP+处理组，100μmol/L葛根素+MPP+处理组，150μmol/L葛根素+MPP+处理组，Pifithrin-ɑ+MPP+处理组的p53蛋白相对表达量分别为0.12±0.01、0.84±0.03、0.72±0.02、0.51±0.03、0.32±0.02、0.21±0.02。5RT-PCR结果表明MPP+诱导可以增加p53mRNA表达；葛根素预处理下调了p53基因及其相关基因p21、Bax、Caspase-3的mRNA的表达，上调了p53基因的负调节因子MDM2和凋亡抑制基因Bcl-2的mRNA的表达。给予p53基因抑制剂干预后，p53基因及其相关基因p21、Bax、Caspase-3、MDM2、Bcl-2的mRNA的表达变化与给予葛根素干预后的结果呈现出较为相似的结果。对照组，MPP+模型组，50μmol/L葛根素+MPP+处理组，100μmol/L葛根素+MPP+处理组，150μmol/L葛根素+MPP+处理组，Pifithrin-ɑ+MPP+处理组的细胞中p53基因的相对表达量分别为1.00±0.00、1.79±0.08、1.66±0.03、1.35±0.10、1.19±0.04、1.10±0.02；p21基因的相对表达量分别为1.00±0.00、1.91±0.04、1.80±0.02、1.67±0.07、1.43±0.12、1.24±0.07；MDM2基因的相对表达量分别为1.00±0.00、0.62±0.11、0.88±0.08、1.27±0.18、1.50±0.18、1.69±0.36；Bax基因的相对表达量分别为1.00±0.00、2.53±0.14、1.90±0.39、1.61±0.32、1.16±0.43、1.03±0.12；Bcl-2基因的相对表达量分别为1.00±0.00、0.18±0.06、0.74±0.07、2.19±0.16、2.30±0.30、2.47±0.20；Caspase-3基因的相对表达量分别为1.00±0.00、1.54±0.09、1.29±0.11、1.09±0.06、1.04±0.18、1.01±0.11。结论MPP+诱导可以导致SH-SY5Y细胞中p53的激活转录并诱导一系列相关靶基因的活化从而导致细胞凋亡，说明p53在SH-SY5Y细胞凋亡中具有重要作用；分别给予p53抑制剂和葛根素干预后均可以在一定程度上抑制细胞凋亡的发生，说明葛根素可能存在通过调节p53及其相关基因的表达来影响MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡，发挥相应的保护作用。