嗜水气单胞菌普遍存在于水生环境,它是一种革兰氏阴性、兼性厌氧菌。嗜水气单胞菌是鱼类的主要致病菌之一,每年都使水产养殖业遭受巨大的济损失。本文对湖南省安乡某鱼场病鱼体内的嗜水气单胞菌进行了分离鉴定及其拮抗菌筛选,主要工作如下:1.嗜水气单胞菌AhX040分离鉴定。本研究从湖南安乡某鱼场发病鱼体内分离纯化出嗜水气单胞菌疑似菌株30株,选取一株优势菌株进行鉴定。结合生理生化特征和16SrDNA序列,鉴定为嗜水气单胞菌新菌株,命名为AhX040(登录号:KU159281)。该菌人工感染试验能使草鱼致病,并探究了其药敏性。2.嗜水气单胞菌AhX040培养条件优化。确定了 AhX040菌株最适NaCl浓度是0.2%(w/v),最适pH是6.5,最适培养温度是30℃。随后正交试验发现该菌最优培养基配方:蛋白胨40 g/L,酵母粉20 g/L,K2HPO410g/L,并测定了该菌的生长曲线,发现培养0-2h为延滞期,2-14h为对数期,14-24h为稳定期,24h以后为衰亡期。3.嗜水气单胞菌AhX040拮抗菌的筛选及拮抗菌活性物质分析。本研究发现铜绿假单胞菌对鱼类病原菌的抑制作用具有广谱性,且对气单胞菌属抑制作用最明显。生测试验发现,铜绿假单胞菌对草鱼的保护率达到90%,其毒性很小。随后,对铜绿假单胞菌的抑菌活性物质进行了理化性质鉴定,结果表明该抑菌活性物质具有耐热性、耐酸碱、对蛋白酶不敏感,能被有机溶剂萃取,可推测该抑菌活性物质为非极性小分子。4.嗜水气单胞菌AhX040拮抗菌的抑菌活性物质分子分离鉴定。铜绿假单胞菌抑菌活性组分经UHPLC分离纯化和LTQ-XL质谱仪鉴定,发现该抑菌活性组分为淡黄色物质,紫外最大吸收峰为310 nm,在有机溶剂的溶解度比较大,微溶于水,分子量为272.07。结合已有研究推测该抑菌活性物质可能是一种芳香族聚酮类物质,藤黄绿脓菌素,分子式为C11H703NC12,有望将该抑菌活性物质开发成生物防治剂应用于水产养殖疾病防治上。