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目的:根管消毒是根管治疗中的关键步骤,其目的是彻底清除根管内的感染源、预防再感染,目前根管消毒还未达到非常理想的程度,因此有必要寻找一种更有效、彻底的根管消毒方法。光动力疗法(photodynamic therapy, PDT)是光、光敏剂和氧共同参与,可产生强氧化性的单态氧杀伤致病微生物的一种新疗法,它具有抗菌作用强、抗菌谱广、作用迅速、安全性好且不会产生耐药性等优点。EDTA(乙二胺四乙酸二钠)作为根管冲洗剂具有渗透性强、能去除根管内玷污层等优点。本研究结合光动力疗法与EDTA的优点将二者联合应用,首先对根管内感染的主要致病菌悬液进行作用,筛选出二者联合时光动力疗法的最佳效应参数,然后在体外建立根管感染模型,探究二者联合进行根管消毒的效果,期望找到一种更加安全、有效的根管消毒方法。方法:1.将粪肠球菌标准株(E. faecalis ATCC29212)复苏厌氧培养48h,调整浓度制备成1×109CFU/mL的菌悬液。2.菌悬液经17%EDTA处理后,用波长532nm半导体激光器分别照射30s、60s、90s、120s与不同浓度光敏剂血卟啉单甲醚(hematoporphyrin monomethylether, HMME)20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml进行作用,选择出EDTA预处理后光动力疗法的最佳参数。3.收集因正畸拔除的离体前磨牙75颗,采用冠向下法进行根管预备,将粪肠球菌在根管内连续培养21天建立粪肠球菌感染模型。4.将感染模型随机均分为5组,A组:PDT处理组;B组:EDTA处理组;C组:PDT联合EDTA处理组;D组:NaClO阳性对照组;E组:生理盐水阴性对照组。各组处理前、处理后分别用纸尖在根管内取样,进行平板菌落计数,统计分析,评价PDT联合EDTA进行根管消毒的即刻效果。5.进行回复实验,在处理后的根管内注满无菌液体培养基,培养7天后用纸尖取样,统计检出细菌的根管个数,统计分析,评价PDT联合EDTA进行根管消毒的远期效果。6.扫描电子显微镜观察处理后的根管内壁形态,进一步验证PDT联EDTA进行根管消毒的效果。结果:1.在本实验条件下,粪肠球菌菌悬液经17%EDTA预处理后光动力疗法的最佳效应参数为:光敏剂HMME浓度40μg/ml;波长532nm、功率密度0.14W/cm2半导体激光器连续照射90s。2.PDT联合17%EDTA对感染根管内粪肠球菌杀伤结果显示,与生理盐水阴性对照组相比,PDT处理组、EDTA处理组、PDT联合EDTA处理组、NaC1O阳性对照组根管内粪肠球菌数目均显著减少(P<0.05);单独PDT组杀菌率为89.77%,与NaClO阳性对照组相比无显著差异(P>0.05);PDT联合EDTA组杀菌率达到100%,明显高于单独PDT处理组、单独EDTA处理组、NaClO阳性对照组和生理盐水阴性对照组(P<0.05)。3.回复实验结果显示,生理盐水阴性对照组与单独EDTA处理组中全部根管都检出了细菌,有菌根管比例达100%;单独PDT处理组和NaClO阳性对照组检出细菌根管个数分别为12个和13个,有菌根管比例分别为80.00%和86.67%;PDT联合EDTA组检出细菌根管数仅为4个,有菌根管比例仅为26.67%,明显少于单独PDT处理组、单独EDTA处理组、NaClO阳性对照组和生理盐水阴性对照组(P<0.05)。4.扫描电子显微镜图像显示:PDT联合EDTA组根管内壁无玷污层及细菌附着,全部牙本质小管口呈开放状态;牙本质小管通畅,无玷污栓阻塞,内壁光滑无细菌附着。结论:1.光动力疗法联合EDTA对体外游离的粪肠球菌有很好的杀灭作用,粪肠球菌菌悬液经17%EDTA预处理后光动力疗法的最佳效应参数为:光敏剂HMME浓度40μg/ml;波长532nm、功率密度0.14W/cm2半导体激光器连续照射90s。2.光动力疗法联合EDTA进行根管消毒,不但能去除根管内玷污层,而且还能有效杀灭根管内粪肠球菌,并且有较好的远期效果,是一种高效的根管消毒方法,有望为提高临床根管消毒效率提供一条新途径。