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砀山酥梨是中国的梨主栽品种之一,具有果大汁多、味甜酥脆等优点,果实分为脱萼果和宿萼果两种,宿萼果较多,果形不端正。宿萼果易在萼洼处形成果锈,石细胞增多,影响外观与内在品质,在市场上经济效益降低。应用化学药剂如福星(flusilazole)和多效唑(PP333)等花期喷洒后,虽可降低宿萼率,但不合理使用易导致有毒物质残留问题,无法达到无公害果品生产加工的要求。因此,运用生物技术的相关方法找出导致萼片宿存的关键基因,以期为改良这一性状及梨品种选育奠定理论基础。本文采用植物生长调节剂喷洒法进行试验设计,采用酶联免疫法测定砀山酥梨幼果内源IAA和内源GA的含量,采用田间调查法统计砀山酥梨幼果的脱萼率和宿萼率,采用标准曲线法测定砀山酥梨幼果IAA氧化酶的酶活,采用荧光定量PCR法测定ARP基因的相对表达量,采用SSH文库构建和生物信息学分析方法比对发现相关基因。研究主要结果如下:1.砀山酥梨盛花期后第10天萼片开始脱落。2.内源激素IAA和GA调控萼片发育的关键时期在盛花期后10到20天,且高浓度的内源IAA和高浓度的内源GA是宿萼的关键因素之一3.GA3喷洒处理后,砀山酥梨幼果的内源GA含量增加,内源IAA含量也增加。PP333喷洒处理后,砀山酥梨幼果的内源IAA含量减少。4.喷洒PP333后可以显著提高砀山酥梨幼果脱萼率,喷洒GA3可以显著降低砀山酥梨幼果脱萼率。5.IAA氧化酶活力低是萼片宿存的因素之一,可以通过提高IAA氧化酶活力的方法使砀山酥梨幼果萼片脱落。6.ARP基因表达量低是萼片宿存的因素之一,可以通过提高ARP基因表达丰度使砀山酥梨幼果萼片脱落。7.3-异丙基苹果酸脱氢酶和N-酰基-L-氨基酸氨基水解酶两种酶参与萼片生长发育相关代谢途径,推测这两种酶可能是砀山酥梨幼果期萼片发育代谢途径中重要的相关酶。