目的：从基因转录水平了解球形幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)基因表达的变化，选择在球形菌中相对高表达的两个基因克隆入真核表达载体并检测其表达，为抗球形菌DNA疫苗的研制奠定基础。 方法：1．幽门螺杆菌标准株NCTC11637和2株临床分离株，经抗生素—灭滴灵诱导球变。提取等菌量螺旋形和球形Hp的RNA，RT-PCR扩增Hp 25种基因，这些基因包括毒力基因(kat、aphA、rdxA、frxA、cysS、sodB、ureB、glmM、cagA、vacA、fldA、iceAl、hpaA、fliD、napA、oipA、alpAB、babB、hopZ)；看家基因(scoB、atpD、glnA、recA)和功能不明的外膜蛋白基因(hopW、hopX)。扩增产物经分子定量成像系统进行扫描定量。2．选择表达变化较小的两个基因(即相对高表达基因)glmM、oipA，将其全长基因克隆入T载体进行序列测定，再将其开放读码框架(ORF)克隆入真核表达载体pVAX1。重组质粒glmM／pVAX1、oipA／pVAX1经大量扩增后，瞬时转染胃腺癌细胞系SGC-7901，用pSEAP2—Control Vector作共转染检测转染效率，3天后，用RT—PCR、ELISA检测目的基因表达情况。 结果：1．等菌量的球形Hp RNA量比螺旋形Hp减少。NCTC11637、F44和F49菌株的螺旋菌分别有25、20、19个基因RT-PCR阳性，对应的球形菌相应的基因RT-PCR也为阳性。定量分析结果表明：被检测的基因在球形菌中的表达均比螺旋菌降低。提示球形菌致病性的降低与基因的低表达有关。3株球形菌不同基因表达的变化并不完全一致，表达量变化较小且各菌间较一至的是glmM、oipA、91叭;表达量变化较大且菌间较一致的基因是:napA、sodB、reeA、fliD。2.glmM、oipA全长基因进行序列测定，经分析与GenBallk公布的J99株序列分别有%%和92%同源性。重组质粒glmM/pVAXI、nipA/pVAXI转染SGC一7901后，RT一PCR及ELISA检测结果阳性，证明目的基因表达。 结论:1.球形菌中相对高表达的基因是glmM、oipA、glnA;相对低表达的基因是:napA、sodB、reeA、fliD。2.重组质粒glmM/P VAXI、oip刀pVAXI可用于后续的DNA疫苗研制工作。