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目的：本实验通过对鼻咽癌荷瘤裸鼠分别在各个不同时辰进行放疗增敏后其肿瘤组织中拓扑异构酶工表达水平的研究,来探讨鼻咽癌时辰放疗增敏的作用机制。方法：人鼻咽低分化鳞癌细胞CNE-Ⅱ置于37℃恒温孵箱培养,细胞贴壁达70%的面积时用胰酶消化后制成细胞浓度为、4×106／ml的细胞悬液,将细胞悬液按0.2ml／只接种于裸鼠腋部的皮下,约3周后该部位长出瘤块(最长径约1cm),作为保种传代的荷CNE-I工肿瘤的裸鼠。110只Balb/c雌性裸小鼠在统一光照条件下同步化饲养(光照时间7：00-19：00,黑暗时间19：00-7：00),建立统一的生物节律至少3周以上。建立统一的生物节律后接种低分化鼻咽癌细胞(CNE-I工),建立裸鼠鼻咽癌移植瘤模型。在无菌条件下自荷瘤裸鼠的皮下剥离出肿瘤,接种于裸鼠右侧大腿外侧处,约3周后长出最长径约lcm的近圆形实体瘤。成瘤并达到入组标准后,将入组的96只移植瘤裸鼠随机分为4组：单纯放疗组、放疗+拓扑替康组、单用拓扑替康组、空白对照组,并将每一组按四个时辰3HALO(光照后小时,hours after light onset)、9HALO、15HALO、21HALO分为四个亚组,每亚组为6只裸鼠。其中放疗+拓扑替康组和单用拓扑替康组分别在3HALO、9HALO、15HALO、21HALO四个时间点半小时前给予腹腔注射拓扑替康10 mg/kg,并且放疗+拓扑替康组及放疗组在四个时辰点分别进行单次放疗,剂量为18 Gy；各时辰放疗结束后1小时处死各组裸鼠并获得肿瘤标本,并用福尔马林固定、石蜡包埋,制成组织切片。本实验用免疫组织化学的方法检测各组肿瘤组织中拓扑异构酶工表达水平,并用免疫组化图像分析软件进行半定量分析。本实验采用完全随机单因素方差分析法对各组的免疫组化检测结果进行统计学分析。结果：各组肿瘤标本的免疫组化检测结果(PI值)显示：拓扑异构酶Ⅰ在各组肿瘤标本中的表达呈时间节律性。在各组中,拓扑异构酶工表达最少的是放射增敏组,其中各时辰亚组以15HALO的表达量最低。在15HALO时放射增敏组和单纯放疗组之间拓扑异构酶工Ⅰ的表达差异有统计学意义(P<0.01)。在放射增敏组拓扑异构酶Ⅰ的表达量：15HALO<21HALO<3HALO<9HALO,其中15HALO与其他各组均有统计学差异(P<0.01)。在单纯放疗组中,拓扑异构酶Ⅰ的表达量：21HALO<3HALO<15HALO<9HALO,其中9HALO与其他各组之间均有统计学差异(P<0.05)。在拓扑替康组中,拓扑异构酶Ⅰ的表达量：9HALO<3HALO<21HALO<15HALO。其中15HALO与其他各组均有统计学差异(P<0.01)。结论：根据本实验及本课题组前期研究结果,我们认为拓扑替康时辰增敏的机制可能为：1.鼻咽癌移植瘤拓扑异构酶工表达水平的昼夜节律性变化。2.时辰放疗增敏后拓扑异构酶工表达水平变化。