厦门沙门氏菌耐药基因和PFGE分型的研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 9次 | 上传用户:xiaomai1212
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沙门氏菌(Salmonella)为肠杆菌科沙门氏菌属成员,是一类条件性细胞内寄生的革兰氏阴性肠杆菌,绝大多数可以对人和动物的健康造成威胁,主要引起发热、胃肠炎、腹泻和败血症等。是世界上引起人类食物中毒最多的病原菌,是公共卫生部门的日常监测病原体,也是兽医临床上常见的病原菌。由于疾病治疗及抗菌素类饲料添加剂的不断使用,在各个国家沙门氏菌耐药性传播迅速,耐药菌的大量出现成为全球关注的公共卫生问题。中国是生猪出栏量和生猪消费量世界第一的养猪大国,不洁猪肉制品引起的沙门氏菌食物中毒时有发生,本文将来自猪肝中的沙门氏菌作为主要研究的对象。本研究针对人源沙门氏菌和动物开展了以下工作:1.从猪肝、猪粪、和鸭粪便中分离得到55株沙门氏菌。同时血清分型结果显示,主要分布于6个血清型,以德比和阿贡纳两种血清型为主,分别为27株和21株。2.采用琼脂扩散法对分离菌进行了11种临床常用抗生素的耐药性分析,动物源的沙门氏菌至少对一种药物耐药的菌株的比率高达98.18%,在猪源的菌株中同时对8种抗生素耐药的菌株为9株比例达到16.36%,人源菌株的耐药比例为26.32%,最多耐药种类为3种。3.针对常见的耐药基因设计了8对引物分别是青霉素耐药基因(bIaTEM)和(cmy-2),氯霉素耐药基因(cat1)、四环素耐药基因(tet(A))和(tet(C))、氨基糖苷类耐药基因(aadA1)、磺胺类耐药基因(sul1)(sul2)等。对手头上的沙门氏菌的进行耐药基因筛查,并且与人源沙门氏菌进行比较。用基因手段证明了沙门氏菌耐药的严重性和复杂性。4.选择部分沙门氏菌菌株进行了脉冲场电泳,发现和菌株的耐药谱相对应的在从猪肝和猪粪分离的沙门氏菌的基因谱有很高的多样性,而人类体内分离到的沙门氏菌的基因一致性比较高,通过PFGE结果对沙门氏菌的来源进行推测,发现发生在厦门2006年6月到12月的甲型副伤寒大部分来自同一克隆,说明了用数字化的分子生物学手段进行流行病学研究的便利。总之,本研究阐明了所分离的食品动物产品中沙门氏菌耐药的流行情况,用分子生物学的方法说明了沙门氏菌在临床上的多变性,揭示了源沙门氏菌严重的多重耐药性,其多重耐药性对人类健康的潜在危害应引起重视,表明了沙门氏菌耐药现象的严重性,说明了兽医临床合理用药的迫切性,为进一步研究细菌的耐药现象打下了基础。
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