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目的:本课题通过检测射频消融前后原发性肝癌患者外周血 CD4+、CD25+调节性 T细胞和 TGF-β1的浓度变化情况,分析其意义及相关性,阐明二者的变化规律及相互之间的关系,探讨射频消融对肝癌患者免疫功能的影响,进一步阐明射频消融提高抗肿瘤免疫的部分机制有重要意义。 方法:分别以流式细胞仪和双抗体夹心ABC-ELISA法检测35例原发性肝细胞肝癌患者射频消融治疗前和治疗后1周、1月时外周血中CD4+、CD25+调节性T细胞和外周血TGF-β1浓度水平变化,并与20例手术切除患者进行对比分析。另外检测10例因患胆囊结石行胆囊切除患者手术前后的CD4+、CD25+调节性T细胞和外周血TGF-β1浓度水平作为对照。 结果:所有射频消融组患者瘤体均完全消融,术后3月复查术前 AFP升高者降至<20ng/ml,下降率100%。B超或CT复查肿瘤缩小或液化,有效率100%。手术切除组均获成功。RFA组重要并发症的发生率为5.72%(2/35)。其中,胆心反射1例(2.86%),术后出血1例(2.86%)。手术组重要并发症发生率为40%(8∕20)。其中切口感染裂开2例(10%),术后出血2例(10%),肝功能衰竭1例(5%),胸腹腔积液1例(5%),肺部感染2例(10%)。2组重要并发症发生率有较大差异(P=0.01)。全组无手术死亡。 射频消融术组患者外周血Treg细胞术前占CD4+ T细胞比例术前为12.67±4.96%,RFA后1周为10.75±3.34%,RFA后1月为9.79±2.90%。手术切除组外周血Treg细胞占CD4+T细胞比例术前为13.28±8.64%,1周后为18.37±7.21%,1月后为18.89±8.81%。对照组外周血Treg细胞术前占CD4+T细胞比例术前为5.94±2.40%,1周后为4.54±1.32%,1月后为6.41±1.96%。RFA治疗后外周血Treg细胞在1周、1月后明显下降(F=5.393,P=0.006)。尤其在1月后明显(t=4.052,P=0.000)。手术组患者外周血 Treg细胞在手术后1周明显上升,1月时仍然升高明显(F=4.611,P=0.036)。对照组外周血 Treg细胞在1周、1月后无明显变化(F=2.710 P=0.085)。治疗前 RFA组与手术组外周血 Treg细胞占CD4+T细胞比例无明显差别(t=0.177 P=0.861),在治疗后1周,出现较大差异, RFA组明显下降,而手术组明显升高(t=3.147 P=0.005),1月后差距增大(t=4.169 P=0.001)。 肝癌RFA组患者术前外周血TGF-β1浓度为752.7143±294.0076pg/ml,RFA术后1周浓度为669.401±224.9159pg/ml,1月后浓度为151.4571±142.9632 pg/ml。手术切除组术前 TGF-β1浓度710.85±220.95 pg/ml,术后1周浓度为331.35±151.71pg/ml,1月后浓度为131.55±33.51pg/ml。对照组术前TGF-β1浓度为140.98±34.41pg/ml,术后1周浓度为121.51±41.93pg/ml,术后1月浓度为139.72±35.12pg/ml。RFA组患者外周血TGF-β1浓度在RFA后1周、1月时有明显变化(F=70.761,P=0.000),1周时小幅下降(P=0.131),1月后下降明显(P=0.000)在手术组患者,外周血TGF-β1浓度在手术后1周、1月后有明显下降(F=71.21,P=0.000)。术后1周下降近一半(t=7.323,P=0.000),1月后进一步下降(t=5.615P=0.000)(t=5.615P=0.000),与对照水平接近(t=0.924 P=0.380)。肝癌RFA组与手术组术前TGF-β1浓度比较无显著性差异(t=1.545,P=0.139),2组与对照组比较均有显著差别(t=3.489 P=0.007,t=6.252 P=0.0001)。治疗后1周,RFA组与手术组间比较有显著差别,手术组下降更明显(t=6.149,P=0.000)。治疗后1月,2组外周血 TGF-β1浓度进一步下降与对照组水平接近(t=0.639 P=0.539,t=0.924 P=0.380)。 结论:1、肝癌患者外周血TGF-β1浓度高,CD4+、CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞比例高,自身抗肿瘤免疫能力下降;2、射频消融可以降低外周血TGF-β1浓度和CD4+、CD25+调节性T细胞百分比,恢复机体抗肿瘤免疫力;3、射频消融是治疗肝癌的安全有效的方法,创伤小,并发症少,可以达到与手术切除同样的疗效。