【摘 要】
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目的：探索人胰腺癌细胞来源的exosome及exosome裂解超滤液对DC/CTL混合细胞抗肿瘤活性的影响及机制。方法：采用超速离心法提取SW1990细胞(人胰腺癌细胞系)释放的exosome,低渗法
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目的：探索人胰腺癌细胞来源的exosome及exosome裂解超滤液对DC/CTL混合细胞抗肿瘤活性的影响及机制。方法：采用超速离心法提取SW1990细胞(人胰腺癌细胞系)释放的exosome,低渗法裂解exosome,超滤法去除exosome来源的微小RNA并提纯exosome裂解超滤液。将exosome及其裂解超滤液分别负载到人外周血来源的未成熟树突状细胞(imDC)上并与细胞毒性T淋巴细胞(CTL)共培养,7天后Elisa法检测各组培养液上清液中TNF-a和穿孔素蛋白的浓度,CCK-8法检测DC/CTL昆合细胞对SW1990细胞的杀伤活性。结果：E-DC/CTL组(exosome致敏组)、DC/CTL组(未致敏组)、EL-DC/CTL组(exosome裂解超滤液致敏组)平均TNF-a浓度分别为129.54、189.72、207.13pg/ml;穿孔素蛋白平均浓度分别为2.68、3.71、3.92ng/ml, E-DC/CTL组低于DC/CTL组(P<0.05),EL-DC/CTL组与DC/CTL组无统计学差异(P>0.05)。三组对SW1990的体外实验杀伤率分别为34.17%、49.19%、68.62%,三组之间杀伤率差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论：胰腺癌细胞分泌的exosome可能通过下调CTL的TNF-a和穿孔素的表达而导致DC/CTL抗肿瘤活性下降,其机制可能与exosome来源的miRNA有关；我们建立了一种基于exosome裂解超滤液的DC/CTL诱导模型,其对胰腺癌细胞的杀伤活性显著增强。
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