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背景:高血压已经成为全球重要的健康问题之一,全球约1/3成年人患高血压病,据估计,仅在2000年时,全球已有约9.72亿高血压人群,而到2025年时将增长至15.6亿。高血压可导致全身多个靶器官损害,而肾脏既是引起高血压的靶器官,也是高血压损害的靶器官,高血压可损伤肾组织的各个结构,包括肾血管、肾小球、肾小管间质。同时可引起足细胞的损伤与丢失、上皮间质的转化、肾小管间质的纤维化。因此高血压与肾损伤紧密联系,相互影响。近年来高血压肾病人发病率逐年上升,仅次于糖尿病肾病。研究表明高血压的发生发展除与传统高危因素有关,还与自身交感神经活动过度激活、氧化应激、RAS系统激活有重要关系。而去肾交感神经术(RDN)是近年来治疗高血压的重要手段之一,尤其对于顽固性高血压,常规药物治疗无效,RDN可产生一定的降压作用。因此本研究通过,探讨RDN术对自发性高血压大鼠的高血压和肾功能影响及其可能的机制。为后续临床研究提供理论和实验依据。研究方法:第一部分探讨苯酚的合适剂量建立去肾交感神经大鼠模型将12周龄SHR大鼠随机分为4组:对照组:生理盐水擦拭肾动脉。手术组:分别用10%苯酚0.5 ml,1ml,1.5ml擦拭肾动脉。每周无创尾动脉测血压,4周后,处死大鼠,收集血浆测去甲肾上腺素含量。肾动脉、肾神经行HE、Masson、PAS染色以及TH、NF200免疫组织化学染色。第二部分观察RDN对交感神经活性和氧化应激的影响以及RDN术后高血压和肾纤维化的变化情况。将12周龄SHR、WKY大鼠随机分为3组:对照组(SHR–sham group)和手术组(SHR-RDN group、WKY-RDN group),术前及术后监测血压,20周后,处死大鼠,留取血浆、尿液、肾动脉、肾组织、下丘脑组织作进一步检测。第三部分:观察RDN对中枢ACE2表达影响,给予中枢ACE2激动剂DIZE和拮抗剂MLN-4760后,观察ACE2-Ang(1-7)-Mas轴变化情况,探讨高血压及肾纤维化的可能机制。将12周龄SHR大鼠随机分为4组:对照组(Sham group)和单纯RDN组(RDN group)、ACE2激动剂组(RDN+DIZE group)、ACE2抑制剂组(RDN+MLN-4760 group),在第13周时行RDN术和侧脑室灌注ACE2激动剂和拮抗剂,每周测动脉血压,4周后,处死大鼠,留取血浆、肾组织下丘脑组织作进一步检测。结果:第一部分:1.5ml苯酚组死亡1只大鼠,与肠梗阻有关。术后一月内,与对照组相比,1.5ml苯酚组收缩压逐渐增高(P<0.01),而1ml苯酚组收缩压显著降低(P<0.01),0.5ml组与对照组相比无统计学差异(P>0.05)。肾组织NE含量:对照组、0.5ml组、1.5ml组比较无差异(P>0.05),而1ml组明显降低(P<0.01)。病理检查:对照组肾交感神经正常,0.5ml苯酚组轻度损伤,而1ml组、1.5ml组出现中度至重度损伤伴中度炎性细胞浸润及纤维化,核空泡化,核萎缩,同时部分神经细胞正常结构消失,肾动脉损伤评分分别为0.44±0.3 vs 3.46±0.3 vs 3.66±0.2,P<0.01。表明1ml苯酚能够有效腐蚀肾交感神经,降低血压,降低肾组织中NE含量,成功建立RDN模型,对肾动脉无显著损伤。第二部分:与对照组相比,SHR-RDN组在术后第17周、21周、25周、29周时收缩压显著降低(P<0.05),但第33周时血压逐渐升高,比较无差异(P>0.05)。血浆PRA、Ang II、ALD、NADPH显著降低(P<0.05),e NOS、NO、显著升高(P<0.05)。24h蛋白尿显著降低(P<0.001)。病理检测:SHR-RDN组较对照组肾小球硬化显著减轻,肾小球评分GS明显降低(P<0.01);肾小管间质纤维化显著减轻,间质纤维化面积百分比降低(P<0.01);下丘脑室旁核TH阳性细胞比例显著降低(P<0.001)。表明采用1ml苯酚化学消融RDN术不能完全降低血压,只能延缓血压进展,同时RDN显著降低中枢及外周循环内交感神经活性和氧化应激。这可能是RDN延缓高血压进展,改善肾小球硬化小管间质纤维化的机制之一。第三部分:与对照组相比,RDN组收缩压显著降低。而与RDN组相比,RDN+DIZE组收缩压则进一步降低(168±8.1 vs 151.8±13.6,P<0.05),RDN+MLN-4760组收缩压显著升高(168±8.1 vs 182.6±7.1,P<0.05)。免疫荧光和WB:与对照组相比,RDN术后下丘脑PVN中ACE2、Mas明显表达上调(P<0.05),而ACE1、AT1R明显下调(P<0.05)。在给予中枢DIZE后,与RDN组相比,RDN+DIZE组下丘脑PVN中ACE2、Mas表达进一步上调(1.58±0.026 vs 1.76±0.027;1.57±0.026 vs 2.313±0.037,P<0.05),而ACE1、AT1R进一步下调(P<0.05);在RDN+MLN-4760组中,下丘脑PVN中ACE2、Mas表达进一步下调(1.58±0.026 vs 0.5±0.021;1.57±0.026 vs 1.195±0.015,P<0.05),ACE1、AT1R表达上调。病理检测:与RDN组相比,RDN-DIZE组肾小球硬化显著减轻,GS明显下降(1.42±0.25 vs0.44±0.27,P<0.05)。而RDN-MLN-4760肾小球硬化加重,GS明显增高(1.42±0.25 vs 1.65±0.30,P<0.05)表明中枢激活ACE2能够降低血压,缓解肾小球硬化进展。结论:采用苯酚腐蚀神经法建立RDN大鼠模型,且RDN术可延缓SHR大鼠高血压进展,改善肾功能。其机制主要与抑制中枢交感神经活性、减轻氧化应激、上调下丘脑室旁核内ACE2表达有关。