不同煎煮时间对防风及防风散有效成分和药效作用的影响

来源 :长春中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:robbieqzl
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目的:通过测定不同煎煮时间对防风药液中有效成分升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷含量以及防风不同时间煎煮对防风散中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷含量的影响,并通过复制感冒动物模型研究防风不同煎煮时间对防风散药效学作用影响,探讨防风的最佳煎煮时间,为中药特殊煎煮方法临床应用提供实验依据。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定不同时间煎煮防风单味药以及防风复方防风散中升麻素苷及5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量。色谱柱:INERTSIL ODS-3柱(250×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-水(40:60),柱温30℃,流速1 mL·min-1,检测波长254 nm,进样量10μL。采用热板法、酵母菌致发热法、足跖肿胀法观察具体煎煮时间,明确实验分组和给药量不同时间煎煮防风的防风散对模型动物镇痛作用、解热作用和抗炎作用的影响。酶联免疫法(ELISA)检测足肿胀各组大鼠血清中免疫球蛋白IgA、IgM、IgG的含量。免疫印迹法(Western Blot)检测足肿胀各组大鼠脾脏组织中Toll受体2(TLR2)、Toll受体4(TLR4)及髓样分化因子88(My D88)的蛋白表达。结果:防风饮片煎煮30 min即先煎10min时,其有效成分升麻素苷的含量为7.547mg·g-1,含量最高,5-O-甲基维斯阿米醇苷在煎煮25-35 min含量为3.472 mg·g-1,含量最高且基本稳定。防风散中防风先煎10min时升麻素苷及5-O-甲基维斯阿米醇苷总含量为7.547 mg·g-1,含量最高。镇痛实验结果显示,与空白对照组(BCG)比较,布洛芬组,感冒疏风片组、防风先煎10min、15min防风散组小鼠的痛阈值增加有显著性差异(P<0.01)。解热实验结果表明,与BCG比较,模型组(MG)大鼠造模后各时间点体温均有所升高(P<0.05或P<0.01);与MG比较,布洛芬组,防风先煎0 min、5 min、10 min、15 min防风散组小鼠体温降低具有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。抗炎实验结果表明,与BCG比较,MG大鼠造模后足趾肿胀率各时间点均明显升高(P<0.01);与MG比较,布洛芬组,防风先煎10min组大鼠足趾肿胀率显著降低(P<0.01)。ELISA法检测结果表明,与MG相比,不同时间煎煮防风的防风散各组大鼠免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的含量显著升高(P<0.01或P<0.05),其中防风先煎10min组效果最显著(P<0.01)。Western Blot法检测结果表明,与BCG比较,MG大鼠脾脏组织中TLR2、TLR4、MyD88蛋白含量显著升高;与MG比较,不同时间煎煮防风的防风散各组大鼠脾脏组织中TLR2、TLR4、MyD88蛋白含量均有所降低,其中防风先煎10min组显著降低(P<0.01)。结论:防风单味药和防风散中防风先煎10min时,升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷总含量最高。防风先煎10min的防风散对感冒模型动物的镇痛、解热、抗炎作用显著,对各炎症相关细胞因子,TLRS/MyD88信号通路各炎症蛋白调节效果明显。防风入汤剂应先煎10min为宜。
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