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由传染性法氏囊炎病毒（Infectious bursal disease virus，IBDV）引起的IBD是鸡的一种急性、高度接触性传染病。IBDV主要破坏3-12周龄青年鸡的法氏囊，严重感染可导致发病鸡死亡；存活鸡则由于法氏囊损伤而造成全身性免疫抑制，结果因免疫能力下降，易感染其他传染病。法氏囊病在全世界均有发病，严重危害禽类养殖业。目前还没有特效的药物治疗此病，因此IBDV高效疫苗的研究变得刻不容缓，IBDV抗原表位的确立有助于表位疫苗的研究。研究表明，IBDV属双RNA病毒科（Bimaviridae family）的双RNA病毒属（Avanbimavirus）。IBDV基因组包括2个片段。A片段基因编码蛋白VP2-4-3和VP5；其中VP2和VP3构成病毒的衣壳，VP4作为自身的蛋白酶，而VP5只能在IBDV感染的细胞中被检测。B片段基因编码自身依赖的聚合酶VP1蛋白。迄今，在IBDV的衣壳蛋白上发现多个抗原表位序列。本研究利用噬菌体肽库对实验室保存的3株IBDV单克隆抗体（H53、V1和V38）进行生物淘选，淘选出与IBDV单克隆抗体特异性结合的噬菌体株，进而通过ELISA筛选出能与IBDV竞争性结合IBDV单克隆抗体的噬菌体株，测序分析其序列后预测IBDV的抗原模拟表位序列。具体操作如下：首先：将实验室保存的3株IBDV单克隆抗体（H53、V1和V38）杂交瘤细胞株进行复苏培养，3株杂交瘤细胞培养上清效价分别为1：256、1：64和1：128。3株杂交瘤细胞分别注射8周龄的Balb/c小鼠腹腔制备腹水，ELISA测定腹水效价分别达1：2×10~5，3×10~4，1×10~5以上。H53，V1和V38的亚类鉴定均为IgG2b。采用辛酸-饱和硫酸铵法对3株单克隆抗体提纯，将纯化后的单克隆抗体SDS-PAGE后出现2条带，分别为IgG的轻链与重链。应用凝胶分析软件对蛋白质条带进行光密度扫描，三株单克隆抗体的纯度分别为99.5%，98.6%和99.1%。通过间接ELISA测定样品效价，达1.6×10~4。经处理的单克隆抗体具有较高的纯度和活性，能够保证亲和筛选过程中与噬菌体的特异性结合。其次，利用噬菌体随机12肽库对单克隆抗体H53、V1、V38进行4轮淘选，通过逐轮降低包被浓度及增加洗脱时间来提高单克隆抗体与噬菌体的特异性结合。挑选30个四轮淘洗后的噬菌斑间接ELISA鉴定后获得22个阳性噬菌体克隆；进一步用竞争ELISA获得14个噬菌体株能抑制单克隆抗体与IBDV的结合，其抑制率达50%以上。最后，测定14株噬菌体单克隆序列。运用DNAStar软件分析12肽序列，比对找出共有序列。总之，本研究通过噬菌体12肽库筛选3株IBDV单克隆抗体，成功鉴定出3个抗原模拟表位，即H53识别的抗原模拟表位为XILRXXXXXXHM，V1识别的抗原模拟表位为RXLRLXXPIXQX，V38识别的抗原模拟表位为XRXXRXXRRPRP（X为任意氨基酸）。本实验获得的IBDV抗原表位序列为鸡法氏囊病的致病机理及高效疫苗的研究提供依据，对于IBD的防控具有重要意义。