盐芥生长与盐芥耐盐相关性研究

来源 :山东师范大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:fa1192573654
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拟南芥是一种典型的甜土植物,在盐渍环境中其生长受到严重抑制以至于不能完成生活史。而作为拟南芥的近亲盐芥,却能耐受高盐环境的冲击而完成其生活史。盐芥和拟南芥的cDNA序列相似性超过90%,而且二者的外在形态也基本相似,二者最大的不同在于生长周期的长短有较大差异--盐芥的生长周期要比拟南芥长很多。而自然界其他植物的特点:比如同样是小麦,生长速率不同的不同发育阶段其耐盐能力也有较大差异,在生长慢的时候拥有更强的耐逆境能力。于是我们推测盐芥较拟南芥具有更长的生活周期--即更慢的生长速率是否是其耐盐的原因?如果是,那么这个影响是多大程度?为了研究这个问题,我们首先必须找到一种方法使得盐芥的生长更快和更慢,然后比较其耐盐能力的变化,从而研究盐芥生长速率和耐盐能力之间的关联。   DELLA蛋白是一类非常保守的植物蛋白,因为其在N端拥有一个保守的氨基酸序列DELLA而得名。这类蛋白在水稻中只有一个拷贝,而在拟南芥中却有五个拷贝。其功能研究是最近几年研究的热点。目前已经知道这类蛋白是转录因子,在赤霉素信号转导通路上起抑制作用:拟南芥有三个赤霉素的可溶性受体gidla,gidlb,gidlc,当它们与赤霉素结合后就与细胞核中的DELLA蛋白结合,诱导其被通过泛素介导的蛋白酶体途径降解,从而解除了DELLA蛋白对拟南芥生长的抑制作用,促进拟南芥茎的伸长。如果DELLA蛋白发生功能缺失型突变,那么植株会因为缺失抑制因子而不断伸长最终形成典型的细长形态,与过量施用赤霉素导致的株型类似。相反,如果DELLA蛋白发生功能获得型突变,则由于赤霉素不再能引起DELLA蛋白的降解,而使得其对植株生长的抑制作用即使在赤霉素存在的条件下也得不到解除,从而出现矮茎株型,与赤霉素缺失型突变体的株型类似。   本文的实验思路是通过操作盐芥中的DELLA蛋白的编码基因,改变其体内DELLA蛋白的含量而达到改变其生长速率的目的,进而观测生长速率对植株耐盐能力的影响。基于此,首先克隆了盐芥的DELLA蛋白的编码基因:推测在盐芥的基因族中应该存在不少于拟南芥五个DELLA蛋白的编码基因,而且这五个蛋白功能存在互补,因此在盐芥中KNOCKDOWN DELLA蛋白编码基因的的表达应该不会有明显的表型--盐芥的生长速率不会有明显的改变。所以我们希望通过过量表达gidla来促进DELLA蛋白的降解达到提高盐芥生长速率的目的,另外通过过量表达gai的方式降低盐芥的生长速率,并与野生型盐芥做耐盐能力的对比,从而分析盐芥生长速率对其耐盐能力的影响。
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