小鼠卵巢蛋白质表达谱的构建及多囊卵巢综合症相关蛋白质组学研究

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卵巢是女性生殖腺,其主要作用是产生卵子和雌性激素。在整体水平上对卵巢的蛋白质表达谱进行分析,将为阐明卵子发生以及女性生殖调控的分子机理提供重要信息。基于这一目的,本研究利用蛋白质组学的技术手段研究了小鼠卵巢组织的蛋白组成并建立了小鼠卵巢蛋白质的参考数据库。我们利用双向凝胶电泳对小鼠卵巢蛋白进行了分离,在考马斯亮兰染色后将所有可见的蛋白点切取下,经胰蛋白酶消化以后用MALDI-TOF质谱仪进行鉴定。成功鉴定的213个蛋白点对应于192种蛋白质。利用生物信息学分析我们对每一种蛋白质的分子功能、参与的生物学过程等进行了详细注释,发现约占80%的蛋白质参与了代谢过程。依据Kegg数据库收录的代谢通路我们分析了鼠卵巢组织特征性的代谢途径,分析结果中均具有显著意义的代谢通路包括糖酵解通路和氧化磷酸化等20余条特征性的代谢通路。除参与了代谢过程以外,小鼠卵巢组织中蛋白质还具有一系列其它重要功能,如结合蛋白质和核苷酸、具有水解酶和氧化还原酶的活性、结合离子等。利用PathwayAssist软件,我们对小鼠卵巢蛋白质进行了Complex分子调控网络分析,从中可以看出,在小鼠卵巢组织中有较多蛋白质共同参与调控白介素家族成员,提示我们白介素家族在卵巢中可能有着重要的作用。通过上述研究,我们获得了对小鼠蛋白质表达谱的全景式认识。在此基础上,我们进一步以卵泡发育障碍患者的卵巢组织作为模型来开展研究,选取了3例多囊卵巢综合症为病理类型,通过比较病理卵巢的蛋白表达谱与正常人卵巢的蛋白表达谱,筛选出在两者之间存在明显表达差异的蛋白质并对其中部分蛋白,在卵巢组织中的细胞定位和表达情况进行了研究,分析了它们在卵子发生过程及多囊卵巢综合症发病机制的可能作用。这一研究将有助于阐明卵子发生和排卵障碍的分子机制,同时为临床上女性排卵障碍的诊断和治疗提供重要线索。
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