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目的:研究观察Agr2基因及其相应的AGR2蛋白质在胃癌中的表达,并探讨其相关的临床意义。
材料和方法:我收集了76例胃镜下取活检的胃组织做免疫组织化学染色及HE染色并作出相应的病理分析。在生长曲线实验中胃高分化腺癌细胞株MKN-1和胃低分化腺癌细胞株BGC-823中分别随着时间的生长期间,随着培养基中加入AGR2蛋白质的含量的升高,分别观察这两种细胞株的生长情况。实验表明这两种细胞株的生长分别呈抑制作用。本实验室含有Agr2基因的质粒载体已构建成功,我对它进行了提质粒,跑电泳,酶切鉴定。我对胃高分化腺癌细胞株MKN-1和胃低分化腺癌细胞株BGC-823,乳腺癌细胞株MCF-7,乳腺癌细胞株ZR75-1,以及293T细胞株,293F细胞株分别进行了收细胞后做Western blotting实验。
结果:通过病理诊断其中包括慢性萎缩性胃炎,印戒细胞胃癌,胃粘液腺癌,胃低分化腺癌,胃中分化腺癌,胃高分化腺癌。经过免疫组织化学染色AGR2蛋白质在慢性萎缩性胃炎,胃腺癌中的表达呈逐渐下降的趋势。在生长曲线实验中胃高分化腺癌细胞株MKN-1和胃低分化腺癌细胞株BGC-823中分别随着时间的生长期间,随着培养基中加入AGR2蛋白质的含量的升高,实验表明这两种细胞株的生长分别呈抑制作用。本实验室含有Agr2基因的质粒载体已构建成功,我对它进行了提质粒,跑电泳,酶切鉴定。实验证实了在含有Agr2基因的质粒载体的确已构建成功。我对人胃高分化腺癌细胞株MKN-1和胃低分化腺癌细胞株BGC-823,乳腺癌细胞株MCF-7,乳腺癌细胞株ZR75-1,以及293T细胞株,293F细胞株分别进行了收细胞后做Western blotting实验。检测到AGR2蛋白质有不同程度的表达。
结论:1.AGR2蛋白质在慢性萎缩性胃炎,胃腺癌中的表达呈逐渐下降的趋势。2.在生长曲线实验中人胃高分化腺癌细胞株MKN-1和人胃低分化腺癌细胞株BGC-823中分别随着时间的生长期间,随着培养基中加入AGR2蛋白质的含量的升高,实验表明这两种细胞株的生长分别呈抑制作用。由此我们推测Agr2基因在胃癌中可能是抑癌基因。3.对人胃高分化腺癌细胞株MKN-1和人胃低分化腺癌细胞株BGC-823,人乳腺癌细胞株MCF-7,人乳腺癌细胞株ZR75-1,以及293T细胞株,293F细胞株,转染了空载体质粒pCDNA3.0的293T细胞株,转染了在空载体质粒pCDNA3.0中构建Agr2基因成功的质粒的293T细胞株,分别进行了收细胞后做Western blotting实验。检测到AGR2蛋白质有不同程度的表达,说明在上述的细胞株中AGR2蛋白质的存在。4.Agr2基因及其相应的AGR2蛋白质在胃癌的发生发展和分子诊断中有一定的临床应用价值。