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目的应用跨胎盘RNA干扰技术抑制胚胎鼠BMP-4基因，为获取基因下调小鼠探索经济高效技术。2006年O’Shea发现在小鼠胚胎早期用含单基因质粒干扰可以跨过胎盘下调妊鼠靶基因引起子代鼠相关组织器官发育障碍，并产生畸形小鼠。本课题组在前期工作基础条件下申请NSFC，历时五年研究定量跨胎盘RNAi技术。其间，探索影响跨胎盘RNA干扰技术的条件并首次建立了相关技术平台；应用该技术构建先天性疾病模型动物。方法构建发育相关基因BMP-4下调质粒。通过尾静脉向孕鼠注射Ringer’s液、pSES质粒、pSES-SiBMP-4质粒。部分孕鼠注射48小时后取出胚胎观测胚胎发育变化，并应用RT-PCR及Western blotting检测BMP-4基因mRNA和蛋白质；部分孕鼠自然分娩后研究子代鼠生长发育变化，并用恰当的检查诊断。结果pSES-SiBMP-4组胚胎BMP-4基因mRNA及蛋白表达较Ringer’s组、pSES组下调（P＜0.05）。Ringer’s组、pSES组胚胎鼠发育无明显异常，pSES-SiBMP-4组胚胎鼠头部、胃肠道及脊柱发育异常。新生子代鼠中pSES-SiBMP-4组出现癫痫，肠息肉及先天性巨结肠。结论早期胚胎鼠跨胎盘定量RNA干扰现实可行，可建立稳定的定量跨胎盘RNA干扰技术平台。该方法可用来定量研究基因功能，构建基因下调模型动物。（1）RNAi质粒可跨过早期胎盘调控子代基因表达，证明效果与质粒注入时间窗，质粒质量-浓度，注射速度相关。（2）BMP-4基因对小鼠神经系统（CNS&ENS）、骨骼系统、循环系统、消化道和皮肤的生长发育具关键作用。（3）qTP-RNAi可定量下调子代小鼠BMP-4基因，通过对注射条件的调控定量构建不同疾病的转基因动物模型，包括先天性癫痫、结肠息肉及先天性肠无神经节细胞症模型。