AF是临床最为常见的心律失常之一。据流行病学调查显示,近年来AF的发病率有逐年上升趋势,年龄越大发病率越高,且有器质性心脏病者AF发病率高达40%。AF的危害不仅在于其发作时的临床症状会严重影响患者的生活质量,而且还在于其较高的血栓栓塞发生率导致致残和致死率显著增加。因此,探讨其发病机制并对其加以防治一直是人们关注的热点。近年来,有关AF发生机制的研究已取得较大进展,现认为AF的始发和维持是多种机制共同参与的结果。尽管多种因素相互作用,使得AF的发生变得更为复杂,但归结起来主要涉及两个方面：一是触发因素,表现在刺激交感神经和迷走神经,引起心动过缓、房性期前收缩、房性心动过速和房室传导阻滞等对心房的牵拉作用,使心房压力变化,导致AF的发生；二是结构重构和电重构,这些重构有利于折返的形成。AF电重构主要包括心房ERP和APD缩短,AP传导速度减慢,ERP离散度增加等电生理特征的改变,这种改变有利于AF的发生和维持。电重构的基础是心房肌细胞离子通道和跨膜离子流的改变。心房结构重构在细胞水平上主要体现在两方面：一是心房肌细胞超微结构的改变,包括心房肌细胞退行性改变、内质网扩张、线粒体肿胀、嵴的消失、闰盘非特化区增宽以及糖原颗粒减少和肌原纤维增加；二是心房肌间质发生变化,表现在心房肌间质纤维增生、间质纤维化和心房增大,使得电传导不一致,有助于局部传导阻滞或折返的形成,引起AF的发生。在分子水平上的变化表现为结构蛋白、收缩蛋白、缝隙连接蛋白、离子通道蛋白的降解,使得心房肌细胞的连接和信号传导异常,导致AF的发生和维持。业已发现,OFR、基因的突变、自主神经功能紊乱、离子通道异常和炎症反应等均与AF的发生和维持有关,但炎症与AF的关系越来越引起人们重视。1997年Bruins等首次报道了CRP和IL-6在AF发生时有明显升高的变化,随后有学者在进一步证明CRP与AF关系的同时,还发现其它炎症因子如IL-8、TNF-α等也与AF的发生和发展有关,这些实验结果一方面确立炎症反应在AF发病过程中的地位；另一方面说明炎症可能是AF发生的独立因素,是导致AF的原因。IL-10是1989年Fiorentio从小鼠Th2细胞上清液中发现的一种蛋白,它能抑制Th1的功能,因而被称为细胞因子合成抑制因子。研究表明,IL-10能抑制活化的T淋巴细胞、自然杀伤细胞和巨噬细胞产生细胞因子,能抑制单核巨噬细胞表面主要组织相容抗原Ⅱ类分子的表达,降低抗原提呈细胞的抗原递呈能力,能抑制大鼠AMI后左心室胶原的沉积,改善心室重构,因而它在下调炎症反应和抑制心脏重构中发挥重要作用。近年来,人们发现一种新的炎症标记物—PTX3,并已证明在冠心病、急性冠脉综合征时其水平有明显升高,且与不稳定型心绞痛危险分层有关。在与急性冠脉综合征的相关性研究中,PTX3明显要优于CRP,但PTX3在AF发生和发展中的作用及它与IL-10的关系目前所知甚少,故本文对AF患者心房肌细胞IL-10和PTX3进行研究,旨在揭示它们在AF中的作用,为炎症与AF关系的理论奠定实验基础。目的：探讨PTX3和IL-10在AF发生和维持中的作用及机制,为进一步揭示炎症与AF的关系,防止AF的发生和对其积极加以治疗提供实验依据。方法：1研究对象：根据《赫尔辛基宣言》精神,所有患者术前均经伦理委员会讨论,并已征得患者及其家属知情同意。选择行心脏外科手术患者22例, AF组11例,男6例,女5例,年龄41.5±4.3岁,心功能Ⅱ级9例,Ⅲ级2例,入选患者无其它心律失常病史且AF持续时间大于1年。SR组11例,男5例,女6例,年龄40.7±53岁,心功能Ⅱ级8例,Ⅲ级3例,入选患者无心律失常病史。两组均记录年龄、性别、心功能NYHA分级、心电图、超声心动图及有关实验室检查。甲状腺机能亢进,扩张性心肌病、慢性肺源性心脏病、感染的急性期、肥胖、风湿性疾病、血液和造血系统疾病、内分泌和代谢性疾病、严重肝肾功能不全、近期应用抗生素、阿斯匹林(术前7天停用除外)、ACEI和ARB、他汀类调脂药物等均不列入本研究范围之内。2标本采集：心脏手术中建立体外循环,于心脏停跳前获取右心耳500mg,除去血液和脂肪组织,将其中200mg置入液氮瓶中,然后送入-70℃深低温冰箱冻存、备用。用PCR法和WB法观察慢性AF患者心房肌细胞IL-10和PTX3的变化；另300mg用10 ml氧饱和的无钙液在37℃保温下,于5-10 min内送到实验室。分离心房肌细胞,首先,将AF组分成8份,在4份中,有3份分别加入浓度为8μg/ml、10μg/ml、12μg/ml的PTX3各1ml,与余下的1份和SR组一起放入恒温箱中,作用1h,用PCR法和WB法观察KAch基因和蛋白的变化；另4份做成膜片后,其中3份在灌注液中加入不同浓度的PTX3各1ml,作用20min,用膜片钳技术测定IKAch密度。另外,将AF组分成两份,其中1份加入1ml浓度为12μg/ml的PTX3,与余下1份和SR组一起放入恒温箱中,作用1h,收集上清液,用PCR法、WB法和ELSIA法观察IL-6、TNF-α的水平和NF-κB基因及蛋白的变化。最后,将AF组分成4份,做成膜片后,其中1份加入1m1浓度为12gg/ml的PTX3和1ml浓度为10μg/ml的IL-10,另两份分别加入12μg/ml的PTX3和10μg/ml的IL-10各1ml,用膜片钳技术观察IKAch密度的变化。结果：1慢性AF患者心房肌细胞IL-10 mRNA及IL-10蛋白表达明显低于SR组,而PTX3mRNA及蛋白表达明显高于SR组,IL-10mRNA表达与PTX3 mRNA表达呈负相关,IL-10蛋白表达与PTX3蛋白表达呈负相关,统计学均有显著差异。2 AF组的Kir3.4mRNA表达、GIRK4表达及IKAch密度明显低于SR组,PTX3的剂量越大,它们降低越明显,统计学均有显著差异。3心房肌细胞NF-κBP65的mRNA及蛋白表达和IL-6及TNF-α的表达水平在AF组明显高于SR组,其中大剂量组明显高于AF组,且NF-κBP65的表达分别与IL-6和TNF-α的水平呈正相关,统计学均有显著差异。4大剂量组+IL-10的IKAch密度明显高于大剂量组,AF组+IL-10明显高于AF组和大剂量组+IL-10,统计学均有显著差别。结论：1IL-10和PTX3参与了AF的发生和维持。2 PTX3可通过对慢性AF患者心房肌细胞Kir3.4mRNA表达、GIRK4表达和IKAch密度的影响,使得AF发生和维持。3 PTX3可通过对慢性AF患者心房肌细胞NF-κB、IL-6和TNF-α的影响,促进炎症反应,引起心房重构。4 IL-10在一定程度上对AF的炎症反应有抑制作用,可用于防治AF的心房重构。