基因芯片载体的表面化学处理及核酸固定技术研究

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近年来,在固相载体上固定核酸(寡核苷酸,cDNA,PCR产物等)分子来制备DNA微集阵列(DNA microarray)是制作基因芯片或微型化杂交阵列的关键技术之一,已成为了一种重要的生物学和医学的研究工具,广泛应用于基因突变检测与多态性分析、疾病监测与反义药物筛选、基因表达变化监控等领域。 核酸的固定化是基因芯片制备首先需要解决的问题。在此过程中需要对载体表面进行化学处理,从而有效地将各种核酸探针特异、快速和稳定地固定在所修饰的表面。它直接影响微阵列的性能,在芯片的制备中起着关键的作用。因此,对该领域的研究与开发,将有助于促进我国基因芯片大规模自主生产和应用。 核酸固定技术是涉及到表面化学、分子生物学的交叉学科,主要包括物理吸附和化学偶联(共价连接)两大类。在传统的固定技术中多以物理吸附为主要方式,存在着表面活性差、连接效率低、稳定性差等缺陷。本研究将共价连接方法引入玻片的表面处理和核酸的固定中:改进了经典的多聚赖氨酸(poly-L-lysine)包被法;自行研制研究了两种基于多组分多氨基化合物连接系统和丙烯酸-丙烯酰胺聚合物系
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