【摘 要】
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5-羟基-γ-癸内酯是本课题研究过程中发现的一种新颖物质。结构相近的γ-癸内酯现已被美国FDA认定为食品香料添加剂,应用广泛;同时部分内酯类物质作为菌落群体感应的信号分子的研究也十分广泛。但关于5-羟基-γ-癸内酯的研究较少,本文主要围绕5-羟基-γ-癸内酯的发现及其代谢途径展开研究。利用Bacillus sp. 1s-1发酵产生5-羟基-γ-癸内酯,通过化学反应合成内酯验证并绘制了标准曲线,对产
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5-羟基-γ-癸内酯是本课题研究过程中发现的一种新颖物质。结构相近的γ-癸内酯现已被美国FDA认定为食品香料添加剂,应用广泛;同时部分内酯类物质作为菌落群体感应的信号分子的研究也十分广泛。但关于5-羟基-γ-癸内酯的研究较少,本文主要围绕5-羟基-γ-癸内酯的发现及其代谢途径展开研究。利用Bacillus sp. 1s-1发酵产生5-羟基-γ-癸内酯,通过化学反应合成内酯验证并绘制了标准曲线,对产物中内酯进行了定性定量分析。选用亚油酸甲酯为碳源,将培养基进行均质化处理,在37°C下发酵24 h,再将发酵液经旋蒸浓缩,将HDL的浓度提高到43.5 mg/L。将不同类型的菌种在相同条件下发酵培养,验证了5-羟基-γ-癸内酯的产生具有广泛性。将内酯酶基因导入大肠杆菌BL21中进行全细胞催化,产物为γ-癸内酯。分别从发酵上清液硅烷化处理、发酵菌体沉淀的丁胺反应和不饱和脂肪酸链的双键氧化三个方面开展中间代谢产物的探究实验,只在发酵上清液硅烷化处理实验结果中检测找到了两个中间产物的物质峰,结构尚需验证。5-羟基-γ-癸内酯和高丝氨酸内酯类的信号分子在结构上有较高的相似性,推测这是革兰氏阳性菌产生的一种信号分子,能够与革兰氏阴性菌产生的高丝氨酸内酯在自然环境中进行竞争性抑制的物质,以达到微生物生存中的动态平衡。分别从兰黑紫色杆菌的抑菌圈实验和绿脓菌素产量的影响实验对微生物产生HDL的生理意义进行探索,结果5-羟基-γ-癸内酯并不会抑制紫色素的生成,也不会对绿脓菌素的产量有影响。结论是HDL与高丝氨酸内酯之间没有竞争性抑制,目前对芽孢杆菌1s-1产生5-羟基-γ-癸内酯的生理意义还需进一步探索。
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