普萘洛尔对人肺腺癌A549细胞VEGF表达影响的实验研究

来源 :泰山医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xsybt007
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目的:探讨非选择性β-受体阻滞剂-盐酸普萘洛尔(propranolol)对人肺腺癌细胞(lungadenocarcinoma cells,LAC)血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达情况的影响作用,揭示非选择性β-受体阻滞剂抑制肺腺癌血管生成的机理,旨在为普萘洛尔在抗肿瘤血管治疗方面提供理论和实验依据。方法:把呈对数期生长且生长状态良好的肺腺癌A549细胞挑选出来,将其接种在6孔细胞培养板上进行培养,定时更换细胞培养液,采用随机分组的原则将其分为实验组和空白对照组。倒置显微镜下观察细胞的生长状态,待观察到细胞贴壁达到80%以上时,吸净6孔板中的培养液,实验组的每孔中分别加入2ml不同浓度(1、2、4、8、16ug/ml)的普萘洛尔,空白对照组的孔中加入同等体积的培养液(普萘洛尔浓度为0ug/ml),置于细胞培养箱中培养。孵育24小时后,采用免疫组织化学的方法对肺腺癌A549细胞VEGF的表达进行测定,检测用药前后实验组和空白对照组中肺腺癌A549细胞VEGF蛋白的表达情况。结果:(1)实验组和空白对照组中,肺腺癌A549细胞均存在VEGF的表达,其蛋白阳性信号主要见于细胞核的核膜周围和胞质内。(2)与空白对照组相比,经过普萘洛尔处理后,实验组中肺腺癌A549细胞VEGF的蛋白表达均减弱,其蛋白阳性信号降低,但其表达位置未见改变。结论:(1)肺腺癌A549细胞接种后3~5天呈对数生长,之后进入生长平台期,最后,细胞的生长速度减慢。给予药物处理后,细胞的生长速度明显降低,大量细胞进入凋亡状态。(2)肺腺癌A549细胞的血管内皮细胞膜上普遍存在VEGF受体。VEGF可以在组织内激活ERK/MAPK通路,从而促进血管的生成。(3)普萘洛尔对VEGF蛋白表达阳性的细胞和强阳性的细胞均有杀伤作用,可以抑制肺腺癌A549细胞VEGF蛋白的表达。(4)随着普萘洛尔浓度的增加,肺腺癌A549细胞VEGF蛋白的表达呈浓度依赖式下降。(5)普萘洛尔可以通过降低VEGF蛋白的表达,发挥其阻断血管生成的作用,从而抑制肺癌细胞的增殖、生长及转移。(6)在临床药物治疗的指导作用中,一些靶向药物的应用为我们提供了重要的参考依据。可以考虑应用某些抑制剂,特异性干扰或阻断VEGF在细胞信号传导通路中的作用,为肺癌的治疗提供新的思路。
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