Wnt/β-catenin信号途径在肌源性干细胞类神经分化中的作用

被引量 : 0次 | 上传用户:longyixu13543078183
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的检测肌源性干细胞(muscle-derived stem cells,MDSCs)向类神经细胞分化过程中Wnt/β-catenin信号途径相关分子表达水平的变化。探讨Wnt/β-catenin信号途径在MDSCs分化过程中的调控作用。方法无菌条件下取大鼠后肢骨骼肌,将肌组织剪碎。三重酶消化肌肉组织,分离的细胞经差速贴壁法获取MDSCs。获取的MDSCs于培养箱中采用生长培养基培养,细胞传代培养至5~10代用于后续实验。实验分三组:对照组采用生长培养基单纯体外培养MDSCs;实验组采用含丙戊酸(valproic acid,VA)的生长培养基体外诱导培养MDSCs;抑制剂组在实验组诱导培养的基础上采用Dickkopf-1(DKK-1)和Frizzled蛋白家族(sFRP)抑制Wnt/β-catenin信号途径。诱导培养4天后,于倒置相差显微镜下观察各组细胞间形态差异。诱导培养1天和4天后,RT-PCR检测诱导分化过程中MDSCs内Wnt3a mRNA表达的变化。同时采用Western blot检测诱导分化过程中MDSCs内GSK-3β、β-catenin蛋白含量的变化。诱导培养4天后采用免疫细胞化学法检测各组细胞神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)和神经原纤维(neurofibril,NF)表达情况。结果酶消化法结合差速贴壁获取的MDSCs原代生长贴壁良好,细胞初为短杆状,体积较小,以后逐渐伸展。经过诱导之后实验组和抑制剂组细胞形态出现了明显的改变,细胞变为双极或多极形态,实验组细胞形态改变更加明显。与对照组相比,实验组和抑制剂组Wnt3a mRNA表达水平增加,实验组同时明显高于抑制剂组。与对照组相比,实验组和抑制剂组β-catenin蛋白表达水平增加,实验组同时明显高于抑制剂组。实验组和抑制剂组GSK-3β蛋白表达水平低于对照组。实验组和抑制剂组NSE和NF免疫细胞化学染色均出现阳性染色细胞。抑制剂组神经细胞特异性标记阳性表达水平明显低于实验组。结论Wnt/β-catenin信号途径参与了MDSCs的神经分化过程,对细胞分化过程起到了正性调控作用。
其他文献
城市湿地公园是一种新颖的公园形式,该类公园不仅有效地保护和修复了湿地生态系统的稳定性,而且为居住在城市的居民们提供了一个休闲娱乐的场所,同时这类公园本身就是宣传湿地知
绩效工资是以岗位责任为重点,以绩效考核为核心,把员工的工资收入与其工作岗位和绩效挂钩,实行"以岗定薪、岗变薪变;多劳多得、优劳优酬"的工资分配制度,它有利于激发员工的
绿假单胞菌注射液(PA-MSHA)是一类用于免疫治疗的生物制剂,在临床应用和基础研究中均表现出良好的抗肿瘤作用。其抗肿瘤作用包括调节免疫、提高化疗药物敏感性和逆转耐药等方
医学技术的发展与进步密切了医患关系,医学知识的丰富和医学技术的复杂加大了每一位医务工作者学习掌握医学知识和技能的难度,这对医务人员与患者的关系提出了更高的要求,医
矩阵变换器是一种绿色、无污染的功率变换器,具有结构紧凑、体积小、能量双向流动、输入功率因数可调、输出电压幅值和频率可调、无需直流储能环节等优点。受到了国内外学者的
报道了高交联、水分散体系高温溶胀、高交联碱糊化协同作用非晶颗粒态玉米淀粉的制备方法 ,采用偏光显微镜对其由多晶态向非晶态的变化进行了确认 ,提出在一定条件下 ,高交联
双桥矩阵变换器是一种新型的交-交电力变换器,它是在传统的矩阵变换器间接调制原理基础上推导而来的。和传统的矩阵变换器相比,具有诸多优点,例如,换流简单安全、整流侧可实现零
自改革开放以来,我国经济资源不断涌进东部地区,相较中、西部地区,东部地区经济聚集程度较高,在区域经济发展方面更具优势。于经济聚集作用而言,交通基础设施建设是其主要制
近些年来,国内专家学者致力于土壤盐渍化的理论与实践研究,并取得了丰硕的成果。本文选取CNKI数据库为数据来源,就国内土壤盐渍化研究进行文献计量分析。结果表明:早期国内土
由于山溪与河流的水文和地质条件不同,所以它们对有机污染物的自净作用机理也很不一样。本文用实例说明,山溪是依靠河床表面上的生物膜通过生物接触氧化进行自净的。其自净能