兰州大尾羊免疫器官结构特性研究

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免疫系统是免疫细胞、免疫组织和免疫器官构成,其中免疫器官分成中枢免疫器官和外周免疫器官。免疫是机体自我保护的一种特殊机制,通过抗原性异物的识别与排除来维持机体内各种系统的稳定。免疫器官正常发挥其功能是羊群维持正常免疫力的关键,也是羊舍提高生产性能的前提。为了对我国特有地方品种兰州大尾羊(Lanzhou Fat-tailed sheep,LFTS)进行有效的物种保护,了解其免疫器官相关特性,本研究利用组织学技术研究兰州大尾羊主要免疫器官形态特征,并通过免疫组织化学方法检测免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)、白细胞介素2(Interleukin-2,IL-2)和树突状细胞(dendritic cells,DCs)相关标记蛋白CD21在免疫器官中的表达和定位,通过实时荧光定量PCR技术检测其mRNA表达。初步研究兰州大尾羊免疫器官的结构特点、相关免疫蛋白和基因的表达特性,为兰州大尾羊种质资源保护提供基础数据,为提高其免疫力提供理论依据。结果如下:1.兰州大尾羊胸腺脏器指数为0.09±0.01%,皮质厚度为189.00±3.79μm,皮质和髓质占比分别为0.68±0.03和0.26±0.01,单位面积内(1mm~2)胸腺小体个数为8.00±0.56个。2.兰州大尾羊颈浅淋巴结中成熟淋巴小结数量最大为25.70±1.40个,显著高于肠系膜淋巴结、咽扁桃体和脾脏中的成熟淋巴小结(P<0.05)。脾脏与肠系膜淋巴结中成熟淋巴小结数量无显著差异(P>0.05);咽扁桃体皮质相对面积占比最高(0.47±0.03),显著高于脾脏、颈浅淋巴结和肠系膜淋巴结皮质相对面积占比(P<0.05),而脾脏、颈浅淋巴结和肠系膜淋巴结之间无显著性差异(P>0.05);咽扁桃体髓质相对面积占比(0.42±0.01),显著低于肠系膜淋巴结、颈浅淋巴结和脾脏髓质相对面积占比(P<0.05),而脾脏、颈浅淋巴结和肠系膜淋巴结之间髓质相对面积占比无显著性差异(P>0.05);肠系膜淋巴结的胶原纤维含量占比最高(32.00±2.10),显著高于咽扁桃体(24.00±2.00,P<0.05)。3.免疫组织化学染色结果显示,IgG、IL-2及CD21在兰州大尾羊免疫器官中均有表达。三种蛋白均定位于细胞质,其中IL-2在肠系膜淋巴结和脾脏中有少量细胞的胞核呈免疫阳性。IgG蛋白在胸腺中表达量最高(83.40±1.70),显著高于肠系膜淋巴结(58.17±1.88)、脾脏(50.31±1.22)和咽扁桃体(30.76±1.30,P<0.05)。IL-2蛋白在胸腺中表达量最高(56.19±0.99),显著高于脾脏(19.79±0.21)及其他免疫器官(P<0.05),CD21蛋白在脾脏中表达最强(75.03±0.97),其次是咽扁桃体(55.65±0.87),两者均显著高于胸腺中的表达(46.00±1.00,P<0.05)。4.实时荧光定量PCR结果显示,IgG和IL-2的mRNA在兰州大尾羊胸腺中表达量分别为3.19±0.04、5.5±0.04,显著高于咽扁桃体(1.00±0.01,P<0.05)。CD21 mRNA在兰州大尾羊脾脏中表达量为3.47±0.03显著高于颈浅淋巴结(1.00±0.01,P<0.05)。综上所述,兰州大尾羊不同免疫器官的组织结构与其它哺乳动物基本相似,但胸腺皮质与髓质占比高于相同月龄小尾寒羊;兰州大尾羊胸腺中IgG、IL-2蛋白和其mRNA表达量均显著高于其他免疫器官(P<0.05),而脾脏和咽扁桃体中CD21的表达显著高于中枢免疫器官(P<0.05)。三种蛋白均定位于细胞质,其中IL-2在肠系膜淋巴结和脾脏的细胞核中有少量定位。
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