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目的:1.研究强心苷类药物(地高辛、洋地黄毒甙、哇巴因)对多发性骨髓瘤及套细胞淋巴瘤细胞株增殖和凋亡的影响,筛选出对药物敏感的细胞株。2.探讨哇巴因对Jeko-1细胞株的可能作用机制。方法:1.培养血液肿瘤细胞株(CZ、Jeko-1、Mino、MM1-s、MM1-r)及正常人骨髓单个核细胞,培养基中分别加入不同浓度地高辛(5ng/ml、1Ong/ml、30ng/ml、50ng/ml),哇巴因(1nM、20nM、50nM、100nM),洋地黄毒甙(10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml、l00ng/ml),干预 24 小时、48 小时、72 小时后,用 CCK-8试剂盒检测强心苷类药物的细胞毒性并确定药物作用IC50值。2.Annexin-V/PI双染法检测凋亡用IC50值干预肿瘤细胞24、48小时后检测细胞凋亡情况。3.荧光原位杂交法(FISH)检测敏感细胞株JeKo-1细胞P53缺失、Bcl-1/IgH融合基因重排。4.Western Blot检测Jeko-1细胞相对于正常人骨髓单个核细胞的钠泵α1亚基蛋白表达水平,以及哇巴因作用于Jeko-1细胞后Na+-K+-ATP酶α1、α2亚基、c-myc蛋白水平变化情况。5.Realtime-PCR法检测哇巴因处理后Jeko-1细胞c-myc mRNA水平。结果:1.强心苷类药物对各肿瘤细胞株有抑制增殖、诱导凋亡的作用,并呈时间依赖性和浓度依赖性,其中人MCL Jeko-1细胞株对强心苷类药物敏感,强心苷抑制其增殖的IC50值分别为:地高辛47.79±3.95ng/ml,洋地黄毒甙80.89±1.84 ng/ml,哇巴因37.79±10.23ng/ml;未发现药物对正常人骨髓单个核细胞有影响。2.JeKo-1细胞有P53基因表达缺失以及BCL-1/IgH融合基因重排。3.Jeko-1细胞株相对于BM-MNCs高表达α1亚基蛋白;哇巴因可致Jeko-1细胞内Na+-K+-ATP酶α1亚基蛋白水平升高,α2亚基、c-myc蛋白水平降低,细胞内c-myc mRNA水平降低,均呈浓度时间依赖性。结论:1.本实验所用强心苷类药物可抑制体外培养的多发性骨髓瘤及套细胞淋巴瘤细胞株增殖、促进凋亡,其中,套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞株对强心苷的抑制作用敏感。2.套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞有P53基因缺失及IgH/BCL-1融合基因重排。3.哇巴因作为Na+-K+-ATP酶的特异性配体,可通过调节肿瘤细胞内钠泵α1、α2亚基活性水平,抑制细胞内c-myc蛋白表达,从而成为其诱导Jeko-1细胞凋亡的可能途径。