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为了探讨p53蛋白（Transformation-related protein53, TRP53）在凝血酶影响肺癌细胞功能中的作用及其机制，我们将本实验室已构建成功的重组干涉载体pSilence-shPAR1、过表达载体pIRES-EGFP-PAR1和重组过表达pcDNA3.0-p53分别转入人肺癌细胞PLA-801D、PLA-801C和A549中，采用实时荧光定量PCR和Western Blot方法检测PLA-801D、PLA-801C肺癌细胞中蛋白酶活化受体-1（protease-activated receptor-1, PAR1）的表达量和A549肺癌细胞中p53的表达量；Transwell实验检测细胞的迁移能力；细胞黏附实验检测细胞对细胞外基质的黏附能力；克隆形成实验检测细胞的增殖能力；采用胶原收缩实验评价细胞对细胞外基质的重塑能力；流式细胞术检测凝血酶和p53对细胞凋亡和周期的影响；qPCR检测PAR1参与凝血酶对p53的下调；Western Blot检测凝血酶和p53对半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Cysteine-Aspartic Acid Protease-3, caspase-3）、细胞外信号调节激酶（Extracellular signal-regulated kinase, Erk）和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1（Cyclin-dependent kinase inhibitor1, p21）的影响。以上结果表明：PAR1高表达（PLA-801C-pIRES-EGFP-PAR1）可明显增强PLA-801C细胞的迁移、粘附和胶原收缩能力（p<0.05, p<0.01），而PAR1被有效干涉后（PLA-801D-pSilence-shPAR1），PLA-801D细胞的迁移、粘附和胶原收缩能力显著减弱(p<0.05, p<0.01)，而且PAR1的表达量直接与PLA-801D和PLA-801C细胞的克隆形成能力成正相关；同时，凝血酶可以通过激活PAR1下调p53，但PAR1被封闭后，凝血酶无法通过激活PAR1而下调p53；凝血酶可以下调p53来抑制A549肺癌细胞的凋亡和坏死，这可能与p53下调后active caspase-3也相应下调有关；凝血酶还可以下调p53来抑制A549肺癌细胞的G1期阻滞，这可能与p21下调有关。由此可知，凝血酶通过PAR1促进肺癌细胞的粘附、迁移、增殖和细胞外基质重塑等功能；同时凝血酶可能通过激活PAR1而下调p53，而p53下调后，active caspase-3和p21下调，p-Erk上调，从而抑制A549肺癌细胞的凋亡和坏死（可能与active caspase-3下调有关）和G1期阻滞（可能与p21下调有关），对肺癌的发生发展发挥着重要作用，为抗肺癌治疗提供理论基础。