研究背景:精氨酸甲基化是一个普遍的翻译后修饰过程,与细胞发育和肿瘤发生有关。哺乳动物基因组编码九种精氨酸甲基转移酶（Protein arginine methyltransferases,PRMTs）催化精氨酸残基生成单甲基化精氨酸（Monomethylarginine,MMA）、对称二甲基化精氨酸（Symmetric dimethylarginine,SDMA）和非对称二甲基化精氨酸（Asymmetric dimethylarginine,ADMA）。其中PRMT4（又称为Coactivator-associated arginine methyltransferase 1,CARM1）属于Ⅰ型PRMTs,能催化产生ADMA;PRMT5（Protein arginine methyltransferase 5,PRMT5）属于Ⅱ型PRMTs,能催化产生SDMA。CARM1和PRMT5在多种癌症类型中异常高表达,已被证实与癌症发生有关,因此,CARM1和PRMT5可作为理想靶标用于肿瘤的治疗。通过使用CARM1/PRMT5特异性的小分子抑制剂,或者小干扰RNA,能够抑制众多肿瘤的生长。利巴韦林（Ribavirin,Rib）作为一种广谱抗病毒药,目前主要用于治疗丙型肝炎病毒感染。最近研究发现Rib能抑制胶质瘤和乳腺癌等的生长,但关于利巴韦林在肝癌中的作用及其表观调控机制目前尚无文献报道。目的:研究Rib对肝癌的体内外作用,以及Rib是否能通过调控CARM1和PRMT5抑制肝癌细胞生长,从而为肝癌患者临床治疗提供新的理论基础和治疗方案。方法:1、采用Western blot分析CARM1和PRMT5在正常肝细胞和肝癌细胞株中的表达谱;2、采用MTT和克隆实验,考察不同浓度Rib对HCC细胞体外增殖和克隆形成的影响;3、通过建立肝癌H22小鼠皮下移植瘤模型、人肝癌Hep G2裸鼠原位移植瘤模型和肝癌H22小鼠腹水瘤模型,观察Rib在动物体内对肿瘤生长和生存期影响;4、通过建立肝癌H22小鼠腹水瘤模型,检测分析Rib对小鼠腹膜通透性、腹水中VEGF含量和小鼠免疫功能的影响;5、采用Western blot和/或q RT-PCR分析Rib对CARM1和PRMT5表达水平,及其特异性组蛋白靶标H3R17me2a和H3R8me2s/H4R3me2s积累影响;6、采用Ch IP分析Rib对e IF4E和VEGF启动子区CARM1和H3R17me2a富集的影响。结果:1、Western blot分析结果显示,与正常肝细胞相比,CARM1在肝癌Hep G2、Bel-7402和H22中蛋白表达明显增高,PRMT5在肝癌Hep G2、Bel-7402和CBRH-7919中蛋白表达明显增高;2、MTT和克隆形成实验显示,Rib能够抑制HCC细胞增殖和克隆形成,且对CARM1和PRMT5高表达肝癌细胞,抑制细胞增殖作用明显增强;3、动物体内实验结果显示,Rib抑制皮下移植瘤和原位移植瘤生长,减少腹水生成,并延长小鼠生存期;4、在肝癌H22腹水瘤模型中,Rib能够降低小鼠腹膜通透性和腹水中VEGF水平。此外,Rib能够调节机体的免疫器官,与对照组比较,Rib组的胸腺指数和脾脏指数明显增加;5、RIB降低CARM1和PRMT5表达水平,及其特异性组蛋白靶标H3R17me2a和H3R8me2s/H4R3me2s积累。同时,Rib能降低增值细胞核抗原（Proliferating cell nuclear antigen,PCNA）和癌基因e IF4E蛋白水平;6、Ch IP实验结果显示,Rib能够降低e IF4E和VEGF启动子区CARM1和H3R17me2a富集。结论:利巴韦林（Ribavirin,Rib）能够抑制肝癌的体内外生长和腹水生成,并延长生存期,其机制与Rib同时降低CARM1和PRMT5蛋白表达、以及H3R17me2a和H3R8me2s/H4R3me2s积累有关。此外,Rib也能够降低肝癌H22腹水瘤模型的腹膜通透性和VEGF水平,以及提高小鼠免疫功能。