叶酸修饰的静电纺纳米纤维用于癌细胞靶向捕获的研究

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循环肿瘤细胞(CTCs)是存在于外周血中的少量恶性细胞,起源于原发肿瘤或转移灶。循环肿瘤细胞的检测有助于研究肿瘤转移机制、指导肿瘤治疗、判断治疗效果、为推断预后提供可靠参考和监测肿瘤的转移或复发。细胞捕获的研究在癌症转移的早期诊断中,具有非常重要的意义。静电纺丝是一种有效地制备纳米或微米级纤维的生产技术,所制得的纳米纤维具有极大的比表面积,且易于进行表面修饰;同时,纳米纤维能够很好地模拟天然细胞外基质,为细胞的粘附、增殖及生理功能提供良好的微环境。在癌症的早期诊断中,许多癌细胞捕获材料由于缺乏特异性、检测灵敏度差,常常导致癌症患者无法及早发现病情,威胁生命健康。据报道,静电纺纳米纤维能提供大量的细胞接触位点,使单位体积内捕获细胞的数量增加;同时通过表面修饰,可提高癌细胞捕获灵敏度及特异性。本课题将叶酸(FA)修饰的聚乙二醇(PEG)固定到聚乙烯醇/聚乙烯亚胺(PVA/PEI)静电纺纳米纤维表面,用于癌细胞的特异性捕获。通过静电纺丝法制备PVA/PEI纳米纤维,随后通过碳化二亚胺(EDC)/羟基琥珀酰亚胺(NHS)偶联法制备FA-PEG-COOH,并将其共价连接到戊二醛蒸汽交联处理过的PVA/PEI纳米纤维表面,再采用乙酰化反应中和纤维表面剩余氨基。本文制备的静电纺PVA/PEI纳米纤维的形貌均一、表面光滑、平均直径为425±60.8nm,且经过戊二醛交联和表面修饰后,纳米纤维的形貌并没有发生显著的变化。机械性能评估实验结果显示,戊二醛交联后,纤维膜抵抗外界拉伸的能力增强。经过表面修饰后的纳米纤维具有良好的血液相容性。激光共聚焦显微镜定性试验及细胞计数器定量试验证明FA-PEG-COOH修饰的纳米纤维可大大提高高表达叶酸受体(FR)的人脑胶质瘤细胞(U87MG)的捕获效率。因此,本文所制备的材料有望在癌症早期检测和诊疗中实现循环肿瘤细胞的捕获。
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